ឧបករណ៍រកឃើញអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក មេរោគ Monkeypox (MPV)

កញ្ចប់នេះមានផ្ទុកសារធាតុសម្រាប់ដំណើរការការធ្វើតេស្ត ឬការត្រួតពិនិត្យគុណភាពចំនួន 48 រួមទាំងសមាសធាតុដូចខាងក្រោមៈ

សារធាតុ Reagent A

សារធាតុប្រតិកម្មB

ចំណាំ៖ សមាសធាតុនៃលេខបាច់ផ្សេងគ្នាមិនអាចប្រើជំនួសគ្នាបានទេ។

【លក្ខខណ្ឌផ្ទុក និងអាយុកាលធ្នើ】

1.Reagent A/B អាចត្រូវបានរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 2-30°C ហើយអាយុកាលធ្នើគឺ 10 ខែ។

2. សូមបើកគម្របបំពង់សាកល្បងតែនៅពេលដែលអ្នកត្រៀមខ្លួនសម្រាប់ការធ្វើតេស្តប៉ុណ្ណោះ។

3. កុំប្រើបំពង់សាកល្បងលើសពីកាលបរិច្ឆេទផុតកំណត់។

4. កុំប្រើបំពង់រាវរកលេចធ្លាយ។

【ឧបករណ៍ដែលអាចអនុវត្តបាន។】

សាកសមសម្រាប់ប្រព័ន្ធវិភាគ LC480 PCR, Gentier 48E ប្រព័ន្ធវិភាគ PCR ដោយស្វ័យប្រវត្តិ, ប្រព័ន្ធវិភាគ ABI7500 PCR ។

【តម្រូវការគំរូ】

1. ប្រភេទគំរូដែលអាចអនុវត្តបាន។: បំពង់ក swabs គំរូ។

2. ដំណោះស្រាយគំរូ៖បន្ទាប់ពីការផ្ទៀងផ្ទាត់ វាត្រូវបានណែនាំអោយប្រើទឹកអំបិលធម្មតា ឬបំពង់ការពារមេរោគដែលផលិតដោយជីវវិទ្យា Hangzhou Testsea សម្រាប់ការប្រមូលសំណាក។

ជូតបំពង់ក៖ជូត tonsils pharyngeal ទ្វេភាគី និងជញ្ជាំង pharyngeal ក្រោយជាមួយ swab សំណាកមាប់មគដែលអាចចោលបាន ជ្រលក់ swab ចូលទៅក្នុងបំពង់ដែលមានដំណោះស្រាយសំណាក 3mL បោះចោលកន្ទុយ ហើយរឹតបន្តឹងគម្របបំពង់។

3. ការផ្ទុកនិងការដឹកជញ្ជូនគំរូ:សំណាកដែលត្រូវធ្វើតេស្តគួរតែត្រូវបានធ្វើតេស្តឱ្យបានឆាប់តាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។សីតុណ្ហភាពនៃការដឹកជញ្ជូនគួរតែរក្សាទុកនៅ 2 ~ 8 ℃។ សំណាកដែលអាចធ្វើតេស្តក្នុងរយៈពេល 24 ម៉ោងអាចត្រូវបានរក្សាទុកនៅ 2 ℃ ~ 8 ℃ ហើយប្រសិនបើសំណាកមិនអាចធ្វើតេស្តបានក្នុងរយៈពេល 24 ម៉ោង វាគួរតែរក្សាទុកនៅតិចជាង ឬស្មើ។ ទៅ -70 ℃ (ប្រសិនបើមិនមានលក្ខខណ្ឌផ្ទុកនៃ -70 ℃, វាអាចត្រូវបានរក្សាទុកនៅ -20 ℃ជាបណ្តោះអាសន្ន), ជៀសវាងការកើតឡើងម្តងទៀត

ត្រជាក់និងរលាយ។

4.ការប្រមូលគំរូត្រឹមត្រូវ ការផ្ទុក និងការដឹកជញ្ជូនមានសារៈសំខាន់ចំពោះដំណើរការនៃផលិតផលនេះ។

【វិធីសាស្រ្តសាកល្បង】

1. ដំណើរការគំរូ និងការបន្ថែមគំរូ

1.1 ដំណើរការគំរូ

បន្ទាប់ពីលាយដំណោះស្រាយសំណាកខាងលើជាមួយសំណាក យកគំរូ 30μL ទៅក្នុងបំពង់បញ្ចេញ DNA ហើយលាយវាឱ្យស្មើៗគ្នា។

1.2 ការផ្ទុក

យក 20μL នៃសារធាតុ reconstitution reagent ហើយបន្ថែមវាទៅក្នុង reagent រកឃើញ MPV បន្ថែម 5μL នៃសំណាកដែលបានដំណើរការខាងលើ (ការត្រួតពិនិត្យវិជ្ជមាន និងអវិជ្ជមានត្រូវដំណើរការស្របគ្នានឹងសំណាកគំរូ) គ្របគម្របបំពង់ ហើយ centrifuge វានៅ 2000rpm សម្រាប់ 10 វិនាទី។

2. ការពង្រីក PCR

2.1 ផ្ទុកបន្ទះ/បំពង់ PCR ដែលបានរៀបចំទៅឧបករណ៍ fluorescence PCR ការត្រួតពិនិត្យអវិជ្ជមាន និងការត្រួតពិនិត្យវិជ្ជមានត្រូវកំណត់សម្រាប់ការធ្វើតេស្តនីមួយៗ។

2.2 ការកំណត់ឆានែល fluorescent៖

1) ជ្រើសរើសឆានែល FAM សម្រាប់ការរកឃើញ MPV;

2) ជ្រើសរើសឆានែល HEX / VIC សម្រាប់ការរកឃើញហ្សែនគ្រប់គ្រងខាងក្នុង;

3. ការវិភាគលទ្ធផល

កំណត់បន្ទាត់គោលខាងលើចំណុចខ្ពស់បំផុតនៃខ្សែកោង fluorescent របស់វត្ថុបញ្ជាអវិជ្ជមាន។

4. ការត្រួតពិនិត្យគុណភាព

4.1 ការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមាន៖ គ្មានតម្លៃ Ct ត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងប៉ុស្តិ៍ FAM, HEX/VIC ឬ Ct＞40；

4.2 ការត្រួតពិនិត្យជាវិជ្ជមាន៖ នៅក្នុងបណ្តាញ FAM, HEX/VIC, Ct≤40；

4.3 តម្រូវការខាងលើគួរតែពេញចិត្តក្នុងការពិសោធន៍ដូចគ្នា បើមិនដូច្នោះទេ លទ្ធផលតេស្តមិនត្រឹមត្រូវ ហើយការពិសោធន៍ត្រូវធ្វើម្តងទៀត។

【កាត់តម្លៃ】

គំរូមួយត្រូវបានចាត់ទុកថាជាវិជ្ជមាននៅពេលដែល៖ លំដាប់គោលដៅ Ct≤40, ហ្សែនគ្រប់គ្រងខាងក្នុង Ct≤40។

【ការបកស្រាយលទ្ធផល】

នៅពេលដែលការត្រួតពិនិត្យគុណភាពត្រូវបានឆ្លងកាត់ អ្នកប្រើប្រាស់គួរតែពិនិត្យមើលថាតើមានខ្សែកោងពង្រីកសម្រាប់គំរូនីមួយៗនៅក្នុងឆានែល HEX/VIC ប្រសិនបើមាន និងជាមួយ Ct≤40 វាបង្ហាញថាហ្សែនគ្រប់គ្រងខាងក្នុងត្រូវបានពង្រីកដោយជោគជ័យ ហើយការធ្វើតេស្តពិសេសនេះមានសុពលភាព។អ្នកប្រើប្រាស់អាចបន្តទៅការវិភាគតាមដាន៖

3.សម្រាប់គំរូជាមួយនឹងការពង្រីកហ្សែនគ្រប់គ្រងខាងក្នុងបានបរាជ័យ (HEX/VIC

ឆានែល Ct＞40 ឬមិនមានខ្សែកោងពង្រីក) ការផ្ទុកមេរោគទាប ឬអត្ថិភាពនៃ PCR inhibitor អាចជាហេតុផលនៃការបរាជ័យ ការពិនិត្យគួរតែធ្វើឡើងម្តងទៀតពីការប្រមូលសំណាក។

4.សម្រាប់សំណាកវិជ្ជមាន និងមេរោគវប្បធម៌ លទ្ធផលនៃការត្រួតពិនិត្យផ្ទៃក្នុងមិនប៉ះពាល់ទេ។

សម្រាប់សំណាកដែលធ្វើតេស្តអវិជ្ជមាន ការត្រួតពិនិត្យផ្ទៃក្នុងត្រូវតែធ្វើតេស្តវិជ្ជមាន បើមិនដូច្នេះទេលទ្ធផលទាំងមូលមិនត្រឹមត្រូវទេ ហើយការពិនិត្យត្រូវធ្វើម្តងទៀត ដោយចាប់ផ្តើមពីជំហានប្រមូលសំណាក។