Monkeypox Virus (MPV) ნუკლეინის მჟავის გამოვლენის ნაკრები

ნაკრები შეიცავს რეაგენტებს 48 ტესტის დასამუშავებლად ან ხარისხის კონტროლისთვის, შემდეგი კომპონენტების ჩათვლით:

რეაგენტი ა

ᲠეაგენტიB

შენიშვნა: სხვადასხვა სერიის ნომრების კომპონენტები არ შეიძლება ურთიერთშენაცვლებით იქნას გამოყენებული

【შენახვის პირობები და შენახვის ვადა】

1.რეაგენტი A/B შეიძლება ინახებოდეს 2-30°C ტემპერატურაზე, შენახვის ვადა 10 თვეა.

2. გთხოვთ გახსენით სინჯარის საფარი მხოლოდ მაშინ, როცა მზად იქნებით ტესტისთვის.

3. არ გამოიყენოთ სინჯარები ვარგისიანობის ვადის გადაცილებით.

4. არ გამოიყენოთ გაჟონვის აღმომჩენი მილი.

【მოქმედი ინსტრუმენტი】

შესაფერისია LC480 PCR ანალიზის სისტემისთვის, Gentier 48E ავტომატური PCR ანალიზის სისტემისთვის, ABI7500 PCR ანალიზის სისტემისთვის.

【ნიმუშის მოთხოვნები】

1.შესაბამისი ნიმუშის ტიპები: ყელის ნაცხის ნიმუშები.

2. სინჯის ხსნარი:შემოწმების შემდეგ, რეკომენდირებულია გამოიყენოთ ჩვეულებრივი ფიზიოლოგიური ხსნარი ან ვირუსის შესანარჩუნებელი მილი, რომელიც წარმოებულია Hangzhou Testsea-ს ბიოლოგიის მიერ ნიმუშების შეგროვებისთვის.

ყელის ტამპონი:წაშალეთ ორმხრივი ფარინგეალური ტონზილები და ფარინგეალური უკანა კედელი ერთჯერადი სტერილური სინჯის ამოღების ტამპონით, ჩაყარეთ ტამპონი ტუბში, რომელიც შეიცავს 3 მლ სინჯის ხსნარს, გადააგდეთ კუდი და გამკაცრეთ მილის საფარი.

3. ნიმუშის შენახვა და მიწოდება:შესამოწმებელი ნიმუშები უნდა შემოწმდეს რაც შეიძლება მალე.ტრანსპორტირების ტემპერატურა უნდა შენარჩუნდეს 2~8℃-ზე. ნიმუშები, რომელთა ტესტირება შესაძლებელია 24 საათის განმავლობაში, შეიძლება ინახებოდეს 2℃~8℃ ტემპერატურაზე და თუ ნიმუშები ვერ შემოწმებულია 24 საათის განმავლობაში, უნდა ინახებოდეს ნაკლები ან ტოლი -70℃-მდე (თუ არ არის შენახვის პირობები -70℃, მისი შენახვა შესაძლებელია -20℃-ზე დროებით), თავიდან აიცილოთ განმეორება

გაყინვა და დათბობა.

4. ნიმუშის სათანადო შეგროვება, შენახვა და ტრანსპორტირება გადამწყვეტია ამ პროდუქტის მუშაობისთვის.

【ტესტირების მეთოდი】

1.ნიმუშების დამუშავება და ნიმუშის დამატება

1.1 ნიმუშის დამუშავება

ზემოაღნიშნული ნიმუშის ხსნარის ნიმუშებთან შერევის შემდეგ, შეიტანეთ 30 μL ნიმუში დნმ-ის გამოშვების რეაგენტის მილში და თანაბრად აურიეთ.

1.2 ჩატვირთვა

აიღეთ 20 μL აღდგენის რეაგენტი და დაამატეთ MPV გამოვლენის რეაგენტს, დაამატეთ 5 μL ზემოთ დამუშავებული ნიმუში (დადებითი კონტროლი და უარყოფითი კონტროლი უნდა დამუშავდეს ნიმუშების პარალელურად), დააფარეთ მილის თავსახური, ცენტრიფუგა 2000 rpm 10-ზე. წამი.

2. PCR გაძლიერება

2.1 მომზადებული PCR ფირფიტა/მილაკები ჩატვირთეთ ფლუორესცენტული PCR ინსტრუმენტზე, უარყოფითი კონტროლი და დადებითი კონტროლი უნდა დაყენდეს ყოველი ტესტისთვის.

2.2 ფლუორესცენტური არხის პარამეტრი:

1)აირჩიეთ FAM არხი MPV გამოვლენისთვის;

2)აირჩიეთ HEX/VIC არხი შიდა კონტროლის გენის გამოვლენისთვის;

3. შედეგების ანალიზი

დააყენეთ საბაზისო ხაზი უარყოფითი კონტროლის ფლუორესცენტური მრუდის უმაღლესი წერტილის ზემოთ.

4.ხარისხის კონტროლი

4.1 უარყოფითი კონტროლი: არ არის გამოვლენილი Ct მნიშვნელობა FAM, HEX/VIC არხში, ან Ct＞40；

4.2 დადებითი კონტროლი: FAM, HEX/VIC არხში, Ct≤40；

4.3 ზემოაღნიშნული მოთხოვნები უნდა დაკმაყოფილდეს იმავე ექსპერიმენტში, წინააღმდეგ შემთხვევაში ტესტის შედეგები არასწორია და საჭიროა ექსპერიმენტის განმეორება.

【შეწყვეტილი ღირებულება】

ნიმუში ითვლება დადებითად, როდესაც: სამიზნე თანმიმდევრობა Ct≤40, შიდა კონტროლის გენი Ct≤40.

【შედეგების ინტერპრეტაცია】

ხარისხის კონტროლის გავლის შემდეგ, მომხმარებლებმა უნდა შეამოწმონ, არის თუ არა გამაძლიერებელი მრუდი თითოეული ნიმუშისთვის HEX/VIC არხში, არის თუ არა და Ct≤40-ით, ეს მიუთითებს, რომ შიდა კონტროლის გენი წარმატებით არის გაძლიერებული და ეს კონკრეტული ტესტი მოქმედებს.მომხმარებლებს შეუძლიათ გააგრძელონ შემდგომი ანალიზი:

3. შიდა კონტროლის გენის ამპლიფიკაციის მქონე ნიმუშებისთვის წარუმატებელი (HEX/VIC

არხი, Ct＞40, ან გამაძლიერებელი მრუდის გარეშე), დაბალი ვირუსული დატვირთვა ან PCR ინჰიბიტორის არსებობა შეიძლება იყოს წარუმატებლობის მიზეზი, გამოკვლევა უნდა განმეორდეს ნიმუშის შეგროვებიდან;

4.დადებით ნიმუშებზე და კულტივირებულ ვირუსზე შიდა კონტროლის შედეგები არ მოქმედებს;

უარყოფითი ტესტის ნიმუშებისთვის, შიდა კონტროლის ტესტი უნდა იყოს დადებითი, წინააღმდეგ შემთხვევაში, საერთო შედეგი არასწორია და გამოკვლევა უნდა განმეორდეს, დაწყებული ნიმუშის შეგროვების ეტაპიდან.