ICH-CPV-CDV IgG ტესტის ნაკრები
ძაღლის ინფექციური ჰეპატიტის/პარვოს ვირუსის/დისტემპერის ვირუსის IgG ანტისხეულების ტესტის ნაკრები (ICH/CPV/CDV IgG ტესტის ნაკრები) შექმნილია ძაღლის IgG ანტისხეულების ნახევრად რაოდენობრივად შესაფასებლად ძაღლის ინფექციური ჰეპატიტის ვირუსისთვის (ICH), Canine Parvo. და ძაღლის ჭირის ვირუსი (CDV).
ნაკრების შიგთავსი
შინაარსი | რაოდენობა |
კარტრიჯი, რომელიც შეიცავს გასაღების და განვითარების ხსნარებს | 10 |
ColorScale | 1 |
ინსტრუქციის სახელმძღვანელო | 1 |
შინაური ცხოველების ეტიკეტები | 12 |
დიზაინი და პრინციპი
თითოეულ კარტრიჯში არის ორი კომპონენტი შეფუთული: გასაღები, რომელიც დეპონირებულია დამცავი ალუმინის ფოლგით დალუქულ ქვედა ნაწილში გამშრალთან ერთად და დამცავი ალუმინის ფოლგით დალუქულ ზედა ნაწილებში ცალკე.
თითოეული კარტრიჯი შეიცავს ყველა საჭირო რეაგენტს ერთი ნიმუშის ტესტირებისთვის. მოკლედ, როდესაც გასაღები ჩასმულია და ინკუბირებულია რამდენიმე წუთის განმავლობაში ზედა ნაწილში 1, რომელშიც დეპონირებულია სისხლის ნიმუში, სპეციფიკური IgG ანტისხეულები განზავებულ სისხლის ნიმუშში, თუ არსებობს, დაუკავშირდება ICH, CPV ან ჩასმული გასაღების სხვადასხვა დისკრეტულ ლაქებზე იმობილიზირებულია CDV რეკომბინანტული ანტიგენები. შემდეგ გასაღები გადაიცემა დარჩენილ ზედა განყოფილებებში დროული ინტერვალებით ეტაპობრივად. შეკრული სპეციფიური IgG ანტისხეულები ლაქებზე იქნება ეტიკეტირებული ზედა ნაწილში 3, რომელიც შეიცავს ანტიკანური IgG ფერმენტის კონიუგატს და საბოლოო შედეგები წარმოდგენილი იქნება მეწამულ-ლურჯი ლაქების სახით გასაღებზე.
განყოფილება 6, რომელიც შეიცავს სუბსტრატს. დამაკმაყოფილებელი შედეგისთვის დანერგილია სარეცხი საფეხურები. ზედა ნაწილში 2, შეუზღუდავი IgG და სხვა ნივთიერებები სისხლის ნიმუშში იქნება ამოღებული. ზედა ნაწილში 4 და 5, შეუზღუდავი ან
ჭარბი ანტი-კანური IgG ფერმენტის კონიუგატი ადეკვატურად გამოირიცხება. დასასრულს, ზედა ნაწილში 7, ჭარბი ქრომოსომა განვითარებული სუბსტრატიდან და შეკრული ფერმენტის კონიუგატი ზედა ნაწილში 6 მოიხსნება. შესრულების მართებულობის დასადასტურებლად, საკონტროლო ცილა შეყვანილია გასაღების ყველაზე ზედა ადგილზე. მეწამულ-ლურჯი ფერის ლაქა უნდა ჩანდეს წარმატებული ტესტირების პროცესის დასრულების შემდეგ.
შენახვა
1. შეინახეთ ნაკრები ნორმალურ მაცივარში (2~8℃).
არ გაყინოთ ნაკრები.
2. ნაკრები შეიცავს ინაქტივირებულ ბიოლოგიურ მასალას. ნაკრები უნდა იყოს დამუშავებული
და განადგურდება ადგილობრივი სანიტარული მოთხოვნების შესაბამისად.
ტესტის პროცედურა
მომზადება ტესტის ჩატარებამდე:
1. მიიყვანეთ კარტრიჯი ოთახის ტემპერატურამდე (20℃-30℃) და მოათავსეთ სამუშაო სკამზე, სანამ კარტრიჯის კედელზე თერმული ეტიკეტი არ გახდება წითელი ფერის.
2. გასაღების დასაყენებლად სამუშაო სკამზე მოათავსეთ სუფთა ქსოვილის ქაღალდი.
3. მოამზადეთ 10μL დისპენსერი და 10μL სტანდარტული პიპეტის წვერები.
4. ამოიღეთ ქვედა დამცავი ალუმინის ფოლგა და გადაიტანეთ გასაღები კარტრიჯის ქვედა განყოფილებიდან სუფთა ქაღალდზე.
5. დადგით ვაზნა სამუშაო სკამზე ვერტიკალურად და დაადასტურეთ, რომ ზედა განყოფილების ნომრები ჩანს სწორი მიმართულებით (სწორი ნომრის შტამპები თქვენსკენ). ოდნავ შეეხეთ კარტრიჯს, რათა დარწმუნდეთ, რომ ზედა განყოფილებებში არსებული ხსნარები უკან დაბრუნდებიან ბოლოში.
ტესტის ჩატარება:
1. ზედა ნაწილების დამცავი ფოლგა საჩვენებელი თითით და ცერით ფრთხილად გადააფარეთ მარცხნიდან მარჯვნივ, სანამ არ გამოაშკარავდება მხოლოდ ზედა განყოფილება 1.
2. მიიღეთ შემოწმებული სისხლის ნიმუში დისპენსერის ნაკრებით სტანდარტული 10 μL პიპეტის წვერის გამოყენებით.
შრატის ან პლაზმის შესამოწმებლად გამოიყენეთ 5 μL.
მთლიანი სისხლის შესამოწმებლად გამოიყენეთ 10 μL.
EDTA ან ჰეპარინის ანტიკოაგულანტი მილები რეკომენდებულია პლაზმისა და მთლიანი სისხლის შეგროვებისთვის.
3. ჩადეთ ნიმუში ზედა ნაწილში 1. შემდეგ ასწიეთ და ჩამოწიეთ დისპენსერის დგუში რამდენჯერმე შერევის მისაღწევად (ღია ლურჯი ხსნარი წვერში შერევისას მიუთითებს ნიმუშის წარმატებულ დეპოზიტზე).
4. აიღეთ გასაღები გასაღების დამჭერთან საჩვენებელი თითით და ცერა თითით და ჩადეთ გასაღები ზედა განყოფილებაში 1 (დაადასტურეთ გასაღების ყინვაგამძლე მხარე თქვენსკენ, ან დაადასტურეთ, რომ დამჭერზე ნახევრად წრე არის მარჯვნივ, როცა მიმართავს. შენ). შემდეგ აურიეთ და გააჩერეთ გასაღები ზედა ნაწილში 1 5 წუთის განმავლობაში.
5. გადააფარეთ დამცავი ფოლგა განუწყვეტლივ მარჯვნივ, სანამ მხოლოდ კუპე არ გამოვა.
6. გადააფარეთ დამცავი ფოლგა განუწყვეტლივ მარჯვნივ, სანამ მხოლოდ კუპე არ გამოვა.
7.გახსენით დამცავი ფოლგა განუწყვეტლივ მარჯვნივ, სანამ მხოლოდ კუპე არ გამოაშკარავდება. აიღეთ გასაღები დამჭერით და ჩადეთ გასაღები ღია განყოფილებაში 4. შემდეგ აურიეთ და გააჩერეთ გასაღები ზედა განყოფილებაში 4 1 წუთის განმავლობაში.
8.გახსენით დამცავი ფოლგა განუწყვეტლივ მარჯვნივ, სანამ მხოლოდ კუპე არ გამოაშკარავდება. აიღეთ გასაღები დამჭერით და ჩადეთ გასაღები ღია განყოფილებაში 5. შემდეგ აურიეთ და გააჩერეთ გასაღები ზედა განყოფილებაში 5 1 წუთის განმავლობაში.
9.გახსენით დამცავი ფოლგა განუწყვეტლივ მარჯვნივ, სანამ მხოლოდ კუპე არ გამოაშკარავდება. 6. აიღეთ გასაღები დამჭერით და ჩადეთ გასაღები ღია განყოფილებაში 6. შემდეგ აურიეთ და გააჩერეთ გასაღები ზედა განყოფილებაში 6 5 წუთის განმავლობაში.
10.გახსენით დამცავი კილიტა განუწყვეტლივ მარჯვნივ, სანამ მხოლოდ კუპე არ გამოაშკარავდება. აიღეთ გასაღები დამჭერით და ჩადეთ გასაღები ღია განყოფილებაში 7. შემდეგ აურიეთ და გააჩერეთ გასაღები ზედა განყოფილებაში 7 1 წუთის განმავლობაში.
11. ამოიღეთ გასაღები ზედა განყოფილებიდან 7 და გააშრეთ ქსოვილის ქაღალდზე დაახლოებით 5 წუთის განმავლობაში, სანამ წაიკითხავთ შედეგებს.
შენიშვნები:
არ შეეხოთ გასაღების წინა ბოლოს გაყინულ მხარეს, სადაც არის ანტიგენები და საკონტროლო ცილა იმობილიზაციაში (სატესტო და საკონტროლო რეგიონი).
მოერიდეთ სატესტო და საკონტროლო ზონის გახეხვას გასაღების წინა ბოლოს მეორე გლუვი მხარის შერევისას თითოეული ზედა განყოფილების შიდა კედელზე მიყრით.
შერევისთვის რეკომენდებულია გასაღების 10-ჯერ აწევა და დაწევა თითოეულ ზედა ნაწილში.
გასაღების გადაცემამდე გამოაჩინეთ მხოლოდ შემდეგი ზედა განყოფილება.
საჭიროების შემთხვევაში, მიამაგრეთ მოწოდებული შინაური ცხოველების ეტიკეტები ერთზე მეტი ნიმუშის ტესტირებისთვის.
ტესტის შედეგების ინტერპრეტაცია
შეამოწმეთ მიღებული ლაქები კლავიშზე სტანდარტული ColorScale-ით
არასწორია:
საკონტროლო ადგილზე ხილული მეწამულ-ლურჯი ფერი არ ჩანს
უარყოფითი(-)
სატესტო ლაქებზე ხილული მეწამულ-ლურჯი ფერი არ ჩანს
დადებითი (+)
ხილული მეწამულ-ლურჯი ფერი ჩნდება საცდელ ლაქებზე
სპეციფიკური IgG ანტისხეულების ტიტრები შეიძლება ილუსტრირებული იყოს სამი დონით