Kit Deteksi Asam Nukleat Monkeypox (MPV).

Kit kasebut ngemot reagen kanggo ngolah 48 tes utawa kontrol kualitas, kalebu komponen ing ngisor iki:

Reagen A

ReagenB

Cathetan: Komponen nomer batch sing beda-beda ora bisa digunakake bebarengan

【Kahanan Panyimpenan lan Urip Beting】

1.Reagen A / B bisa disimpen ing 2-30 ° C, lan urip beting 10 sasi.

2. Mangga mbukak tutup tabung test mung nalika sampeyan siyap kanggo test.

3. Aja nggunakake tabung uji ngluwihi tanggal kadaluwarsa.

4. Aja nggunakake tabung deteksi bocor.

【Instrumen sing ditrapake】

Cocog kanggo Cocog kanggo sistem analisis PCR LC480, Sistem analisis PCR Otomatis Gentier 48E, sistem analisis PCR ABI7500.

【Syarat Sampel】

1. Jinis sampel sing ditrapake: sampel swab tenggorokan.

2. Solusi sampling:Sawise verifikasi, dianjurake kanggo nggunakake saline normal utawa tabung pengawetan Virus sing diprodhuksi dening biologi Hangzhou Testsea kanggo koleksi sampel.

swab tenggorokan:usap tonsil pharyngeal bilateral lan tembok pharyngeal posterior kanthi swab sampling steril sekali pakai, celupake swab menyang tabung sing ngemot larutan sampling 3mL, buang buntut, lan kenceng tutup tabung.

3. Sample panyimpenan lan pangiriman:Sampel sing bakal diuji kudu dites sanalika bisa.Suhu transportasi kudu katahan ing 2 ~ 8 ℃. Sampel sing bisa diuji sajrone 24 jam bisa disimpen ing 2 ℃ ~ 8 ℃ lan yen conto ora bisa diuji sajrone 24 jam, kudu disimpen kurang saka utawa padha. kanggo -70 ℃ (yen ora ana kondisi panyimpenan saka -70 ℃, bisa disimpen ing -20 ℃ sementara), supaya bola

pembekuan lan thawing.

4. Koleksi sampel sing tepat, panyimpenan, lan transportasi kritis kanggo kinerja produk iki.

【Metode Pengujian】

1. Pengolahan sampel lan tambahan sampel

1.1 Pengolahan sampel

Sawise nyampur solusi sampling ing ndhuwur karo conto, njupuk 30μL saka sampel menyang tabung reagen release DNA lan nyampur roto-roto.

1.2 Loading

Njupuk 20μL saka reagen reconstitution lan ditambahake menyang reagen deteksi MPV, nambah 5μL saka sampel diproses ing ndhuwur (Kontrol positif lan kontrol negatif bakal diproses ing podo karo karo conto), nutupi tutup tabung, centrifuge ing 2000rpm kanggo 10 detik.

2. PCR amplifikasi

2.1 Muat piring/tabung PCR sing disiapake menyang instrumen PCR fluoresensi, Kontrol negatif lan kontrol positif kudu disetel kanggo saben tes.

2.2 Setelan saluran neon:

1) Pilih saluran FAM kanggo deteksi MPV;

2) Pilih saluran HEX/VIC kanggo deteksi gen kontrol internal;

3. Hasil analisis

Setel garis dasar ing ndhuwur titik paling dhuwur saka kurva fluoresensi kontrol negatif.

4. Kontrol kualitas

4.1 Kontrol negatif: Ora ana nilai Ct sing dideteksi ing FAM, saluran HEX/VIC, utawa Ct> 40;

4.2 Kontrol positif: Ing FAM, saluran HEX/VIC, Ct≤40；

4.3 Persyaratan ing ndhuwur kudu ditindakake ing eksperimen sing padha, yen ora, asil tes ora valid lan eksperimen kudu diulang maneh.

【Cut mati nilai】

Sampel dianggep positif nalika: Urutan target Ct≤40, Gen kontrol internal Ct≤40.

【Interpretasi asil】

Sawise kontrol kualitas liwati, pangguna kudu mriksa yen ana kurva amplifikasi kanggo saben sampel ing saluran HEX / VIC, yen ana lan Ct≤40, iku nuduhake gen kontrol internal wis kasil digedhèkaké lan test tartamtu iki bener.Pangguna bisa nerusake menyang analisis tindak lanjut:

3. Kanggo sampel kanthi amplifikasi gen kontrol internal gagal (HEX/VIC

saluran, Ct> 40, utawa ora kurva amplifikasi), viral load kurang utawa anané PCR inhibitor bisa dadi alesan saka Gagal, ujian kudu bola saka koleksi spesimen;

4.Kanggo sampel positif lan virus budaya, asil kontrol internal ora mengaruhi;

Kanggo sampel sing dites negatif, kontrol internal kudu dites positif yen asil sakabèhé ora bener lan pamriksan kudu diulang, diwiwiti saka langkah koleksi spesimen.