SARS-COV-2中和抗体検出キット(ELISA)
【目的の使用】
SARS-COV-2中和抗体検出キットは、ヒト血清および血漿中のSARS-COV-2に対する総中和抗体の定性的および半定量的検出を目的とした競合酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)です。 SARS-COV-2中和抗体検出キットは、SARS-COV-2に対する適応免疫応答を持つ個人を特定するための支援として使用でき、最近または以前の感染を示しています。 SARS-COV-2中和抗体検出キットは、急性SARS-COV-2感染の診断に使用しないでください。
【導入】
コロナウイルス感染症は通常、中和抗体反応を誘発します。 Covid-19患者のセロコンバージョン率は、それぞれ7日目と14日目の症状の発症で50%および100%です。知識を提示するために、血液中の対応するウイルス中和抗体は、抗体の有効性を決定するための標的として認識され、中和抗体のより高い濃度がより高い保護効果を示しています。プラーク還元中和試験(PRNT)は、中和抗体を検出するためのゴールドスタンダードとして認識されています。ただし、スループットが低く、運用の要件が高いため、PRNTは大規模な血清症とワクチン評価には実用的ではありません。 SARS-COV-2中和抗体検出キットは、血液サンプルの中和抗体を検出し、このタイプの抗体の濃度レベルに特別にアクセスできる競合酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)方法論に基づいています。
【テスト手順】
1.別々のチューブで、調製したHACE2-HRP溶液のアリコート120μL。
2.6μlのキャリブレーター、未知のサンプル、各チューブ内の品質コントロールとよく混合します。
3.ステップ2で調製された各混合物の100μlを、事前に設計されたテスト構成に応じて、対応するマイクロプレートウェルに移動します。
3.プレートをプレートシーラーでカバーし、37°Cで60分間インキュベートします。
4.プレートシーラーを削除し、ウェルあたり4回、おおよその300μlの1×洗浄溶液でプレートを4回洗浄します。
5.ペーパータオルにプレートを入れて、ステップを洗浄した後、ウェルの残留液を除去します。
6.各ウェルに100μlのTMB溶液を追加し、20〜25°Cで20分間暗闇でプレートをインキュベートします。
7.各ウェルに50μlの停止溶液を追加して、反応を停止します。
8. 10分以内にマイクロプレートリーダーの吸光度を450 nmで読み取ります(精度のパフォーマンスを高めるにはアクセサリが推奨されるため、630nmをお勧めします。