サル痘ウイルス (MPV) 核酸検出キット

キットには、48 の検査または品質管理を処理するための試薬が含まれており、次のコンポーネントが含まれます。

試薬A

試薬B

注: 異なるバッチ番号のコンポーネントを互換的に使用することはできません。

【保管条件と賞味期限】

1.試薬A/Bは2～30℃で保存可能で、有効期限は10ヶ月です。

2.試験管の蓋は試験の準備ができたときにのみ開けてください。

3.使用期限を過ぎた試験管は使用しないでください。

4.漏洩検知管は使用しないでください。

【適用楽器】

LC480 PCR 分析システム、Gentier 48E 自動 PCR 分析システム、ABI7500 PCR 分析システムに適しています。

【サンプル要件】

1.適用サンプル種類: 喉の綿棒のサンプル。

2.サンプリング溶液：検証後、サンプル採取には生理食塩水または杭州テストシーバイオロジー社製のウイルス保存チューブを使用することをお勧めします。

喉の綿棒:両側の咽頭扁桃と咽頭後壁を使い捨ての滅菌サンプリング綿棒で拭き、3mL のサンプリング溶液が入ったチューブに綿棒を浸し、尾を捨て、チューブのカバーを締めます。

3.サンプルの保管と配送:検査対象のサンプルはできるだけ早く検査する必要があります。輸送温度は2～8℃に保ってください。24時間以内に検査できるサンプルは2℃～8℃で保管でき、24時間以内に検査できないサンプルは2℃～8℃以下で保管してください。 -70℃まで（-70℃の保管条件がない場合は、一時的に-20℃で保管できます）、繰り返しは避けてください。

凍結と解凍。

4.この製品の性能には、適切なサンプルの収集、保管、輸送が重要です。

【試験方法】

1.サンプル処理とサンプル添加

1.1 サンプル処理

上記サンプリング溶液とサンプルを混合した後、サンプル 30μL を DNA 放出試薬チューブに取り、均一に混合します。

1.2 読み込み

再構成試薬 20 μL を取り、MPV 検出試薬に加え、上記で処理したサンプル 5 μL を加え（陽性コントロールおよび陰性コントロールはサンプルと並行して処理するものとします）、チューブのキャップを閉め、2000 rpm で 10 分間遠心分離します。秒。

2. PCR増幅

2.1 準備した PCR プレート/チューブを蛍光 PCR 装置にロードします。ネガティブ コントロールとポジティブ コントロールをテストごとに設定します。

2.2 蛍光チャンネル設定：

1) MPV 検出用の FAM チャネルを選択します。

2) 内部対照遺伝子検出用の HEX/VIC チャネルを選択します。

3.結果分析

ベースラインをネガティブコントロールの蛍光曲線の最高点より上に設定します。

4.品質管理

4.1 ネガティブコントロール：FAM、HEX/VIC チャネルで Ct 値が検出されない、または Ct＞40;

4.2 ポジティブコントロール：FAM、HEX/VIC チャネルでは、Ct≤40；

4.3 上記の要件は同じ実験で満たされる必要があります。満たさない場合、テスト結果は無効となり、実験を繰り返す必要があります。

【カットオフ値】

サンプルは次の場合に陽性とみなされます: 標的配列 Ct≤40、内部対照遺伝子 Ct≤40。

【結果の解釈】

品質管理に合格したら、ユーザーは HEX/VIC チャネルの各サンプルに増幅曲線があるかどうかを確認する必要があります。存在する場合、Ct ≤ 40 であれば、内部対照遺伝子が正常に増幅されており、この特定のテストが有効であることを示します。ユーザーはフォローアップ分析に進むことができます。

3.内部対照遺伝子の増幅に失敗したサンプルの場合(HEX/VIC)

チャネル、Ct＞40、または増幅曲線なし）、ウイルス量が低い、またはPCR阻害剤の存在が失敗の原因である可能性があるため、検体採取から検査を繰り返す必要があります。

4.陽性サンプルおよび培養ウイルスの場合、内部対照の結果は影響しません。

陰性と判定されたサンプルについては、内部対照が陽性と判定される必要があります。そうでない場合、全体的な結果は無効となり、検体採取ステップから始めて検査を繰り返す必要があります。