ערכת גילוי נוגדנים מנוטרלים SARS-COV-2 （ELISA)

【שימוש מיועד】

ערכת גילוי נוגדנים מנטרלים SARS-COV-2 היא בדיקה חיסונית מקושרת לאנזים תחרותית (ELISA) המיועדת לגילוי איכותי וחצי-כמותי של נוגדנים מנטרלים מוחלטים ל- SARS-COV-2 בסרום אנושי ובפלסמה. ערכת גילוי הנוגדנים המנטרלים Sars- COV-2 יכולה לשמש כסיוע בזיהוי אנשים עם תגובה חיסונית אדפטיבית לסרס- COV-2, מה שמצביע על זיהום אחרון או קודם. אין להשתמש בערכת גילוי הנוגדנים של SARS-COV-2 לאבחון זיהום SARS-COV-2 חריף.

【מָבוֹא】

זיהומים של Coronavirus גורמים בדרך כלל לתגובות נוגדנים מנטרלות. שיעורי ההמרה הסרוקית בקרב חולי COVID-19 הם 50% ו 100% ביום 7 ו -14 לאחר הופעת הסימפטומים, בהתאמה. כדי להציג את הידע, נוגדן המנטרל את הנגיף המתאים בדם הוא מוכר כמטרה לקביעת יעילות הנוגדנים וריכוז גבוה יותר של הנוגדן המנטרל מעידים על יעילות הגנה גבוהה יותר. מבחן נטרול הפחתת פלאק (PRNT) הוכר כסטנדרט הזהב לגילוי נוגדנים מנטרלים. עם זאת, בשל התפוקה הנמוכה והדרישה הגבוהה יותר לפעולה, PRNT אינו מעשי לסרודיגנוזיס בהיקף גדול והערכת חיסונים. ערכת גילוי הנוגדנים המנטרלים SARS-COV-2 מבוססת על מתודולוגיית Assary (ELISA) מקושרת לאנזים תחרותית (ELISA), שיכולה לאתר את הנוגדן המנטרל במדגם הדם כמו גם לגשת במיוחד לרמות הריכוז של סוג זה של נוגדן.

 【נוהל בדיקה】

1. בצינורות נפרדים, חלקו 120μl של תמיסת HACE2-HRP המוכנה.

2. הוסיפו 6 μl של כיולים, דגימות לא ידועות, בקרות איכות בכל צינור ומערבבים היטב.

.

3. הכניסו את הצלחת עם אוטם צלחת ודגירה בחום של 37 מעלות צלזיוס למשך 60 דקות.

4. הסר את אטם הצלחת ושטוף את הצלחת עם 300 μl משוער של תמיסת שטיפה 1 × לבאר במשך ארבע פעמים.

5. הקפידו על הצלחת על מגבת הנייר כדי להסיר נוזל שיורי בבארות לאחר שטיפת מדרגות.

6. הוסיפו 100 μl של תמיסת TMB לכל באר ודגור את הצלחת בחושך ב 20 - 25 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות.

7. הוסף 50 μl של תמיסת עצירה לכל באר כדי לעצור את התגובה.

8. קרא את הספיגה בקורא מיקרו -פלייט במהירות של 450 ננומטר תוך 10 דקות (630 ננומטר כאביזר מומלץ לביצועי דיוק גבוהים יותר.