ערכת בדיקת ICH-CPV-CDV IgG
ערכת בדיקת נוגדנים מסוג IG/CPV/CDV IgG נועדה להעריך באופן חצי כמותי את רמות נוגדני IgG לכלבים עבור נגיף הפטיטיס מדבק בכלבים (ICH), נגיף פרבו לכלבים. ו-Canine Distemper Virus(CDV).
תוכן הערכה
| תוֹכֶן | כַּמוּת |
| מחסנית המכילה מפתח ופיתוח פתרונות | 10 |
| סולם צבעים | 1 |
| מדריך הוראות | 1 |
| תוויות חיות מחמד | 12 |
עיצוב ועקרונות
בכל מחסנית ארוזים שני רכיבים: מפתח המופקד יחד עם חומר ייבוש בתא התחתון אטום בנייר אלומיניום מגן, ופתרונות פיתוח, המופקדים בנפרד בתאים העליונים אטומים בנייר אלומיניום מגן.
כל מחסנית מכילה את כל הריאגנטים הדרושים לבדיקת דגימה אחת. בקצרה, כאשר המפתח מוחדר לתוך ודגור למשך מספר דקות בתא העליון 1, בו הופקדה דגימת דם, נוגדני ה-IgG הספציפיים בדגימת הדם המדוללת, אם קיימים, ייקשרו ל-ICH, CPV או אנטיגנים רקומביננטיים CDV משותקים על נקודות נפרדות שונות על המפתח המוכנס. לאחר מכן המפתח יועבר לתאים העליונים הנותרים במרווחי זמן קצובים צעד אחר צעד. נוגדני ה-IgG הספציפיים התוחמים על הכתמים יסווגו בתא העליון 3, המכיל מצומד אנטי-כלבי אנזים IgG והתוצאות הסופיות המוצגות ככתמים סגולים-כחולים על המפתח יפותחו בחלק העליון.
תא 6, המכיל מצע. לקבלת תוצאה משביעת רצון, מוצגים שלבי שטיפה. בתא העליון 2, ה-IgG הבלתי מוגבל וחומרים אחרים בתוך דגימת הדם יוסרו. בתא העליון 4 ו-5, הבלתי מוגבל או
עודף מצומד של אנזים IgG אנטי-כלבי יסולק כראוי. בסוף, בתא העליון 7, יוסר הכרומוזום העודף שפותח ממצע ומצמיד אנזים מוגבל בתא 6 העליון. כדי לאשר את תקפות הביצועים, חלבון בקרה מוצג בנקודה העליונה ביותר במפתח. כתם בצבע סגול-כחול אמור להיות גלוי לאחר סיום תהליך בדיקה מוצלח.
אִחסוּן
1. אחסן את הערכה בקירור רגיל (2~8℃).
אין להקפיא את הערכה.
2. הערכה מכילה חומר ביולוגי מומת. יש לטפל בערכה
והושלך בהתאם לדרישות הסניטריות המקומיות.
נוהל בדיקה
הכנה לפני ביצוע הבדיקה:
1. הביאו את המחסנית לטמפרטורת החדר (20℃-30℃） והניחו אותה על ספסל העבודה עד שהתווית התרמית על דופן המחסנית הופכת לצבע אדום.
2. הנח נייר טישו נקי על ספסל העבודה להנחת המפתח.
3. הכן מתקן 10μL וקצות פיפטה סטנדרטיים של 10μL.
4. הסר את נייר האלומיניום המגן התחתון והצא את המפתח מהתא התחתון של המחסנית על נייר הטישו הנקי.
5. העמידו את המחסנית זקוף על ספסל העבודה ואשרו שניתן לראות את מספרי התא העליון בכיוון הנכון (חותמות מספרים נכונים כלפיכם). הקש מעט על המחסנית כדי לוודא שהתמיסות בתאים העליונים יחזרו לתחתית.
ביצוע הבדיקה:
1. חשוף בזהירות את נייר הכסף בתאים העליונים באצבע ובאגודל משמאל לימין עד לחשיפת התא העליון בלבד 1 .
2. השג את דגימת הדם שנבדקה עם סט המתקן באמצעות קצה פיפטה סטנדרטי של 10μL.
לבדיקת סרום או פלזמה השתמש ב-5μL.
לבדיקת דם מלא השתמש ב-10μL.
צינורות נוגדי קרישה מסוג EDTA או הפרין מומלצים לאיסוף פלזמה ודם מלא.
3. הנח את הדגימה בתא העליון. 1. לאחר מכן הרם והורד את בוכנת המתקן מספר פעמים כדי להשיג ערבוב (תמיסת כחול בהיר בקצה בעת הערבוב מעידה על הפקדת הדגימה המוצלחת).
4. הרימו את המפתח על ידי מחזיק המפתח באצבע ובאגודל בזהירות והכנסו את המפתח לתא העליון 1 (אשרו את הצד הקפוא של המפתח פונה אליכם, או אשרו שהחצי עיגול על המחזיק נמצא בצד ימין כאשר פונה אַתָה). לאחר מכן ערבבו והנח את המפתח בתא העליון 1 למשך 5 דקות.
5. חשוף את רדיד ההגנה ברציפות לכיוון ימין עד לחשיפת התא בלבד. 2. הרימו את המפתח ליד המחזיק והכנסו את המפתח לתא החשוף. 2. לאחר מכן ערבבו והעמידו את המפתח בתא העליון 2 למשך דקה.
6. חשוף את רדיד ההגנה ברציפות לכיוון ימין עד לחשיפת התא בלבד. 3. הרימו את המפתח ליד המחזיק והכנסו את המפתח לתא החשוף. 3. לאחר מכן ערבבו והעמידו את המפתח בתא 3 למשך 5 דקות.
7. חשוף את רדיד ההגנה ברציפות לכיוון ימין עד לחשיפת התא בלבד. 4. הרם את המפתח ליד המחזיק והכנס את המפתח לתא החשוף. 4. לאחר מכן ערבב והנח את המפתח בתא העליון 4 למשך דקה.
8. חשוף את רדיד ההגנה ברציפות לכיוון ימין עד לחשיפת התא בלבד. 5. הרם את המפתח ליד המחזיק והכנס את המפתח לתא החשוף. 5. לאחר מכן ערבב והעמיד את המפתח בתא העליון 5 למשך דקה.
9. חשוף את רדיד ההגנה ברציפות לכיוון ימין עד לחשיפת התא בלבד. 6. הרימו את המפתח ליד המחזיק והכנסו את המפתח לתא החשוף. 6. לאחר מכן ערבבו והעמידו את המפתח בתא העליון 6 למשך 5 דקות.
10. חשוף את רדיד ההגנה ברציפות לכיוון ימין עד לחשיפת התא בלבד. 7. הרימו את המפתח ליד המחזיק והכנסו את המפתח לתא החשוף. 7. לאחר מכן ערבבו והעמידו את המפתח בתא העליון 7 למשך דקה אחת.
11. הוציאו את המפתח מהתא העליון 7 והניחו לו להתייבש על נייר הטישו למשך כ-5 דקות לפני קריאת התוצאות.
הערות:
אל תיגע בצד הכפור של הקצה הקדמי של המפתח, שבו האנטיגנים וחלבון הבקרה משותקים (אזור בדיקה ובקרה).
הימנע משריטה של אזור הבדיקה והבקרה על ידי השענת הצד החלק השני של הקצה הקדמי של המפתח על הקיר הפנימי של כל תא עליון תוך כדי ערבוב.
לערבוב, מומלץ להעלות ולהוריד את המפתח בכל תא עליון 10 פעמים.
חשוף רק את התא העליון הבא לפני העברת המפתח.
במידת הצורך, צרף את תוויות חיות המחמד שסופקו ליותר מבדיקה אחת לדוגמה.
לפרש את תוצאות הבדיקה
בדוק את הכתמים שהתקבלו על המפתח עם ColorScale הסטנדרטי
לֹא בְּתוֹקֶף:
לא מופיע צבע סגול-כחול גלוי על נקודת הבקרה
שְׁלִילִי(-)
לא מופיע צבע סגול-כחול גלוי על כתמי הבדיקה
חיובי (+)
צבע סגול-כחול גלוי מופיע על כתמי הבדיקה
ניתן להמחיש את הציצים של נוגדני ה-IgG הספציפיים בשלוש רמות
