Kit per il rilevamento dell'acido nucleico del virus del vaiolo delle scimmie (MPV).

Il kit contiene reagenti per l'elaborazione di 48 test o controllo qualità, inclusi i seguenti componenti:

Reagente A

ReagenteB

Nota: i componenti di numeri di lotto diversi non possono essere utilizzati in modo intercambiabile

【Condizioni di conservazione e durata di conservazione】

1.Il reagente A/B può essere conservato a 2-30°C e la durata di conservazione è di 10 mesi.

2.Aprire il coperchio della provetta solo quando si è pronti per il test.

3.Non utilizzare le provette oltre la data di scadenza.

4.Non utilizzare un tubo di rilevamento perdite.

【Strumento applicabile】

Adatto per Adatto per il sistema di analisi PCR LC480, il sistema di analisi PCR automatico Gentier 48E, il sistema di analisi PCR ABI7500.

【Requisiti del campione】

1.Tipi di campioni applicabili: campioni di tamponi faringei.

2. Soluzione di campionamento:Dopo la verifica, si consiglia di utilizzare una normale soluzione salina o una provetta per la conservazione del virus prodotta da Hangzhou Testsea Biology per la raccolta dei campioni.

tampone faringeo:pulire le tonsille faringee bilaterali e la parete faringea posteriore con un tampone di campionamento sterile monouso, immergere il tampone nella provetta contenente 3 ml di soluzione di campionamento, eliminare la coda e serrare il coperchio della provetta.

3. Stoccaggio e consegna del campione:I campioni da testare dovrebbero essere testati il ​​prima possibile.La temperatura di trasporto deve essere mantenuta a 2~8℃. I campioni che possono essere testati entro 24 ore possono essere conservati a 2℃~8℃ e se i campioni non possono essere testati entro 24 ore, devono essere conservati a una temperatura inferiore o uguale a -70℃ (se non esiste una condizione di conservazione di -70℃, può essere conservato temporaneamente a -20℃), evitare ripetuti

congelamento e scongelamento.

4. La raccolta, la conservazione e il trasporto adeguati dei campioni sono fondamentali per le prestazioni di questo prodotto.

【Metodo di prova】

1.Elaborazione del campione e aggiunta del campione

1.1 Elaborazione del campione

Dopo aver miscelato la soluzione di campionamento di cui sopra con i campioni, prelevare 30μL di campione nella provetta del reagente di rilascio del DNA e mescolarlo uniformemente.

1.2 Caricamento

Prelevare 20μL del reagente di ricostituzione e aggiungerlo al reagente di rilevamento MPV, aggiungere 5μL del campione trattato sopra (il controllo positivo e il controllo negativo devono essere trattati in parallelo con i campioni), coprire il tappo della provetta, centrifugare a 2000 giri/min per 10 secondi.

2. Amplificazione PCR

2.1 Caricare la piastra/provette per PCR preparata nello strumento PCR a fluorescenza. Per ciascun test devono essere impostati il ​​controllo negativo e il controllo positivo.

2.2 Impostazione del canale fluorescente:

1)Scegli il canale FAM per il rilevamento MPV;

2)Scegliere il canale HEX/VIC per il rilevamento del gene di controllo interno;

3.Analisi dei risultati

Impostare la linea di base sopra il punto più alto della curva fluorescente del controllo negativo.

4. Controllo qualità

4.1 Controllo negativo: nessun valore Ct rilevato nel canale FAM、HEX/VIC o Ct＞40；

4.2 Controllo positivo: nel canale FAM、HEX/VIC, Ct≤40；

4.3 I requisiti di cui sopra devono essere soddisfatti nello stesso esperimento, altrimenti i risultati del test non sono validi e l'esperimento deve essere ripetuto.

【Tagliare il valore】

Un campione è considerato positivo quando: Sequenza target Ct≤40, Gene di controllo interno Ct≤40.

【Interpretazione dei risultati】

Una volta superato il controllo di qualità, gli utenti devono verificare se è presente una curva di amplificazione per ciascun campione nel canale HEX/VIC, se presente e con Ct≤40, indica che il gene di controllo interno è stato amplificato con successo e questo particolare test è valido.Gli utenti possono procedere all'analisi di follow-up:

3.Per i campioni con amplificazione del gene di controllo interno non riuscita (HEX/VIC

canale, Ct>40 o nessuna curva di amplificazione), una bassa carica virale o la presenza di un inibitore della PCR potrebbero essere la ragione del fallimento, l'esame deve essere ripetuto dalla raccolta del campione;

4.Per i campioni positivi e il virus in coltura, i risultati del controllo interno non influiscono;

Per i campioni risultati negativi, il controllo interno deve essere positivo, altrimenti il ​​risultato complessivo non è valido e l'esame deve essere ripetuto, a partire dalla fase di raccolta del campione