SARS-CoV-2 hlutleysandi mótefnagreiningarbúnaður （ELISA)
【Ætlað notkun】
SARS-COV-2 hlutleysandi mótefnagreiningarbúnað er samkeppnishæf ensímtengd ónæmisbælandi greining (ELISA) ætluð til eigindlegs og hálfmagnandi uppgötvunar alls hlutleysandi mótefna gegn SARS-CoV-2 í sermi manna og plasma. Hægt er að nota SARS-COV-2 hlutleysandi mótefnagreiningarbúnaðinn sem hjálpar til við að bera kennsl á einstaklinga með aðlagandi ónæmissvörun við Sars-COV-2, sem gefur til kynna nýlega eða fyrri sýkingu. Ekki ætti að nota SARS-CoV-2 hlutleysandi mótefnagreiningarbúnaðinn til að greina bráða SARS-CoV-2 sýkingu.
【INNGANGUR】
Coronavirus sýkingar örva venjulega hlutleysandi mótefnasvörun. Seroconversion tíðni hjá Covid-19 sjúklingum er 50% og 100% á 7. og 14. degi eftir upphaf einkenna, í sömu röð. Til að kynna þekkingu er samsvarandi vírus hlutleysandi mótefni í blóði viðurkennt sem markmið til að ákvarða verkun mótefna og hærri styrkur hlutleysandi mótefnis benda til meiri verndar verndar. Verið hefur verið viðurkennt að viðurkenna hlutleysingarpróf á skellingu (PRNT) sem gullstaðall til að greina hlutleysandi mótefni. Vegna lítillar afköst þess og hærri krafa um notkun er PRNT ekki raunhæft fyrir stórfelld serodiagnosis og mat á bóluefni. SARS-CoV-2 hlutleysandi mótefnagreiningarbúnaðinn er byggður á samkeppnishæfri ensímstengdum ónæmisbælandi greiningu (ELISA) aðferðafræði, sem getur greint hlutleysandi mótefni í blóðsýni sem og sérstaklega aðgang að styrkleika þessarar tegundar mótefnis.
【Prófunaraðferð】
1. Í aðskildum rörum eru 120 mμl í tilbúinni HACE2-HRP lausn.
2. Bæta við 6 μl af kvarða, óþekkt sýni, gæðaeftirlit í hverju rör og blandaðu vel saman.
3. Transfer 100μl af hverri blöndu sem framleidd var í skrefi 2 í samsvarandi örplötuholur samkvæmt fyrirframhönnuðum prófunarstillingu.
3. Taktu á plötuna með plötuþéttiefni og ræktaðu við 37 ° C í 60 mínútur.
4. Fjarlægðu plötuþéttinguna og þvoðu plötuna með um það bil 300 μl af 1 × WASH lausn á hverja holu í fjórum sinnum.
5.Tappaðu plötuna á pappírshandklæði til að fjarlægja leifarvökva í holunum eftir þvottaskref.
6. Bætið 100 μl af TMB lausn á hverri holu og ræktað plötuna í myrkri við 20 - 25 ° C í 20 mínútur.
7. Bætið 50 μl af stöðvunarlausn til hverrar holu til að stöðva viðbrögðin.
8. Lestu frásog í örplötulesara við 450 nm innan 10 mínútna (630 nm þar sem mælt er með aukabúnaði fyrir meiri nákvæmni árangur.
