SARS-Coc-Coc-2 na-anọpụ iche na-ahụ maka ihe mkpuchi
【Prinsipul】
KARS-CoV-Coc-2 na-anọpụ iche na-ahụ maka ọgwụ na-egosi na-egosi na usoro usoro Elisa.
Na-eji ngalaba na-eme ihe eji eme ihe (RBD)
Receatotor Ace2, emere nnwale a iji memic nke nnabata nje virus-na-ewepụ ndọpụ mmekọrịta.
Ndị calibictors, njikwa dị mma, na ọnya ma ọ bụ plasma na-ejikọ onwe agwakọta nke ọma na ngụgụ
Buffer nwere Hace2-HR Conjugate a na-ama ama na obere tubes. Mgbe ahụ, a na-ebugharị ngwakọta ahụ na
Olulu microplate nwere nke na-enweghị atụ nke na-agbagha agbakwụ na 2 RBD (RBD) maka
ntụtụ. N'ime nkeji iri atọ nke nkeji iri atọ, rbd Antirod na calibrars, QC na
Ihe nlere ga-asọmpi na Hace2-HRP maka ibelata nke RBD na olulu mmiri. Nsote
Ngwunye ahụ, a na-asa olulu mmiri ugboro anọ iji wepu ihe ndị na-enweghị atụ. Ihe ngwọta nke
TMB kwukwara ma tinye ya na nkeji 20 na ụlọ okpomọkụ, na-ebute mmepe nke a
acha anụnụ anụnụ. A na-akwụsị mmepe agba agba nke 1n hcl, na nnabata
tụọ anya na 450 nm. Ike nke agba ahụ guzobere na
Ọnụ ego enzyme nọ, ma na-enwekarị njikọ chiri anya na ego nke ụkpụrụ ahụ dabara adaba n'otu ụzọ ahụ.
Site na ntụnyere na usoro mmezi nke ndị ọrụ calibrament, ịta nke
A na-agbakọ antiboding antiboding na ihe atụ amaghi ama.
【Ihe achọrọ mana enyeghị ya】
1. Distilled ma ọ bụ mmiri
2
3. Atụmatụ Pipette Pipette
4. Ndị na-agụ microplate onye na-agụ nyocha nke ịgụ akwụkwọ na 450.
5. A na-anabata akwụkwọ
6. Mpempe eserese
7. Votex Mixex ma ọ bụ nke
【Nchịkọta ụdị na nchekwa】
1. Ihe nlere na ihe nlere nke plasma anakọtara na tubes nwere K2-EDTA maka ngwa a.
2. A ga-amachi ụdị, enwere ike ịchekwa ya ruo awa 48 na 2 Celsius C - 8 Celsius C tupu ịdọ aka.
A na-enwe ụdị a na-eme ogologo oge (ruo ọnwa 6) ga-ajụ oyi otu ugboro na -20 Celsius C tupu ekwenyeghi.
Zere usoro free na-akwụ ụgwọ.
Promocol
【Nkwadebe Reagent】
1
(20 Celsius ruo 25 Celsius C). Chekwaa ndị na-ege ya ntị na friji ozugbo mgbe iji.
2. A ga-eme ihe nlele na njikwa niile.
3
Ihe efu. Iji maa atụ, itughari 100 μl nke hace2-hrp lekwasị anya na 5.0ml nke HRP differ na
mee ihe ejikọtara hace2-hrp.
4. 1 × Na-asacha Ngwọta: Glegharịa 20 gboo ngwọta nke abụọ na-etinye mmiri ma ọ bụ distilled na a
Olu olu nke 1:19. Dịka ọmụmaatụ, itughari 20 ml nke 20 × Nkeji 2 × Nke 380 ml nke ike ma ọ bụ
Mmiri dị omimi iji mee 400 ml nke 1 × Nkeji.
【Usoro nnwale】
1. Na iche iche, Aliquot 120μL nke njikere hace2-hrp.
2. Tinye 6 μl nke calibrars, ihe nlere amaghi, njikwa di nma na tube obula ma ghee nke oma.
3. Nyefee 100μl nke ngwakọta nke ọ bụla kwadebere na nzọụkwụ 2 n'ime microplate nke ọma
iji kwado nhazi ule.
3. Kpuchie efere ahụ na efere efere ma tinye ya na 37 Celsius C 30 nkeji.
4. Wepu prata ma sachaa efere na ihe dị ka 300 μl nke 1 × Na-atọchagharị ugboro anọ.
5. Kpatụ efere na akwa nhicha akwụkwọ iji wepu mmiri mmiri na olulu mmiri mgbe ị sachara usoro.
6. Tinye 100 μl nke tmb ngwọta nke ọma na nke ọma ma na-akụta efere ahụ n'ọchịchịrị na 20 - 25 Celsius C maka nkeji 20.
7. Tinye 50 μl nke nkwụsị nke ọ bụla iji kwụsị mmeghachi omume.
8. Guo nnabata na microplate onye na - agụ na 450 nm n'ime nkeji iri (630nm dị ka ngwa
Akwadoro maka arụmọrụ dị elu).