Kit Deteksi Antibodi Penetralisir SARS-CoV-2 （ELISA)
【PENGGUNAAN YANG DIMAKSUDKAN】
Kit Deteksi Antibodi Penetralisir SARS-CoV-2 adalah Uji Imunosorben Terkait Enzim Kompetitif (ELISA) yang ditujukan untuk deteksi kualitatif dan semikuantitatif dari total antibodi penetralisir SARS-CoV-2 dalam serum dan plasma manusia. Kit Deteksi Antibodi Penetral SARS-CoV-2 dapat digunakan sebagai bantuan dalam mengidentifikasi individu dengan respons imun adaptif terhadap SARS-CoV-2, yang mengindikasikan infeksi baru atau sebelumnya. Kit Deteksi Antibodi Penetral SARS-CoV-2 tidak boleh digunakan untuk mendiagnosis infeksi SARS-CoV-2 akut.
【PERKENALAN】
Infeksi virus corona biasanya memicu respons antibodi penetralisir. Tingkat serokonversi pada pasien COVID-19 adalah 50% dan 100% masing-masing pada hari ke 7 dan 14 setelah timbulnya gejala. Untuk menyajikan pengetahuan, antibodi penetral virus yang sesuai dalam darah diakui sebagai target untuk menentukan kemanjuran antibodi dan konsentrasi antibodi penetral yang lebih tinggi menunjukkan kemanjuran perlindungan yang lebih tinggi. Tes Netralisasi Pengurangan Plak (PRNT) telah diakui sebagai standar emas untuk mendeteksi antibodi penetralisir. Namun, karena hasil yang rendah dan kebutuhan operasional yang lebih tinggi, PRNT tidak praktis untuk serodiagnosis dan evaluasi vaksin skala besar. Kit Deteksi Antibodi Penetralisir SARS-CoV-2 didasarkan pada metodologi Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), yang dapat mendeteksi antibodi penetral dalam sampel darah serta secara khusus mengakses tingkat konsentrasi antibodi jenis ini.
【Prosedur Tes】
1.Dalam tabung terpisah, alikuot 120μL Larutan hACE2-HRP yang telah disiapkan.
2.Tambahkan 6 μL kalibrator, sampel yang tidak diketahui, kontrol kualitas di setiap tabung dan aduk rata.
3. Pindahkan 100μL setiap campuran yang disiapkan pada langkah 2 ke dalam sumur pelat mikro yang sesuai sesuai dengan konfigurasi pengujian yang telah dirancang sebelumnya.
3. Tutup piring dengan Plate Sealer dan inkubasi pada suhu 37°C selama 60 menit.
4.Lepaskan Plate Sealer dan cuci piring dengan kira-kira 300 μL 1× Wash Solution per sumur sebanyak empat kali.
5.Ketuk piring di atas tisu untuk menghilangkan sisa cairan di dalam lubang setelah langkah pencucian.
6.Tambahkan 100 μL Larutan TMB ke setiap sumur dan inkubasi cawan dalam tempat gelap pada suhu 20 – 25°C selama 20 menit.
7.Tambahkan 50 μL Stop Solution ke setiap sumur untuk menghentikan reaksi.
8.Baca serapan dalam pembaca pelat mikro pada 450 nm dalam waktu 10 menit (disarankan 630nm sebagai aksesori untuk kinerja presisi yang lebih tinggi.
