Monkeypox վիրուսի (MPV) նուկլեինաթթվի հայտնաբերման հավաքածու

Հավաքածուն պարունակում է ռեակտիվներ 48 թեստերի մշակման կամ որակի վերահսկման համար, ներառյալ հետևյալ բաղադրիչները.

Ռեակտիվ Ա

ՌեակտիվB

Նշում. Տարբեր խմբաքանակի համարների բաղադրիչները չեն կարող օգտագործվել որպես փոխարինող

【Պահպանման պայմանները և պահպանման ժամկետը】

1. A/B ռեագենտը կարող է պահվել 2-30°C ջերմաստիճանում, իսկ պահպանման ժամկետը 10 ամիս է:

2. Խնդրում ենք բացել փորձանոթի կափարիչը միայն այն ժամանակ, երբ պատրաստ եք փորձարկմանը:

3. Մի օգտագործեք փորձանոթները պիտանելիության ժամկետից հետո:

4. Մի օգտագործեք արտահոսքի հայտնաբերման խողովակ:

【Կիրառելի գործիք】

Հարմար է LC480 PCR վերլուծության համակարգի, Gentier 48E ավտոմատ PCR վերլուծության համակարգի, ABI7500 PCR վերլուծության համակարգի համար:

【Նմուշի պահանջներ】

1. Կիրառելի նմուշի տեսակները: կոկորդի շվաբրերի նմուշներ:

2. Նմուշառման լուծում.Ստուգումից հետո նմուշների հավաքման համար խորհուրդ է տրվում օգտագործել նորմալ աղի կամ վիրուսի պահպանման խողովակ, որը արտադրվել է Hangzhou Testsea biology-ի կողմից:

կոկորդի շվաբր.միանգամյա օգտագործման ստերիլ նմուշառման շվաբրով սրբել երկկողմանի ըմպանային նշագեղձերը և ֆարինգի հետևի պատը, ընկղմել շվաբրը 3 մլ նմուշառման լուծույթ պարունակող խողովակի մեջ, հեռացնել պոչը և սեղմել խողովակի կափարիչը:

3. Նմուշի պահպանում և առաքում.Փորձարկվող նմուշները պետք է հնարավորինս շուտ փորձարկվեն:Փոխադրման ջերմաստիճանը պետք է պահպանվի 2~8℃: Նմուշները, որոնք կարող են փորձարկվել 24 ժամվա ընթացքում, կարող են պահվել 2℃~8℃ ջերմաստիճանում, իսկ եթե նմուշները չեն կարող փորձարկվել 24 ժամվա ընթացքում, ապա դրանք պետք է պահվեն ավելի քիչ կամ հավասար պայմաններում: մինչև -70℃ (եթե -70℃ պահպանման պայման չկա, այն կարող է ժամանակավորապես պահվել -20℃ ջերմաստիճանում), խուսափել կրկնելուց

սառեցում և հալեցում:

4. Պատշաճ նմուշների հավաքումը, պահեստավորումը և փոխադրումը չափազանց կարևոր են այս ապրանքի կատարման համար:

【Փորձարկման մեթոդ】

1. Նմուշի մշակում և նմուշի ավելացում

1.1 Նմուշի մշակում

Վերոնշյալ նմուշառման լուծույթը նմուշների հետ խառնելուց հետո նմուշի 30 մկլ վերցրեք ԴՆԹ-ի արտազատման ռեագենտի խողովակի մեջ և հավասարաչափ խառնեք:

1.2 Բեռնում

Վերցրեք 20 մկլ վերականգնող ռեակտիվը և ավելացրեք այն MPV հայտնաբերման ռեագենտին, ավելացրեք 5 մկլ վերոնշյալ մշակված նմուշից (դրական հսկողությունը և բացասական հսկողությունը պետք է մշակվեն նմուշներին զուգահեռ), փակեք խողովակի գլխարկը, ցենտրիֆուգեք այն 2000 պտույտ/րոպեում 10 անգամ։ վայրկյան.

2. PCR ուժեղացում

2.1 Պատրաստված PCR թիթեղը/խողովակները լցրեք ֆլուորեսցենտային PCR գործիքի վրա, յուրաքանչյուր փորձարկման համար պետք է սահմանվեն բացասական հսկողություն և դրական հսկողություն:

2.2 Լյումինեսցենտային ալիքի կարգավորում.

1) Ընտրեք FAM ալիք MPV հայտնաբերման համար.

2) Ընտրեք HEX/VIC ալիքը ներքին հսկողության գեների հայտնաբերման համար.

3.Արդյունքների վերլուծություն

Սահմանեք բազային գիծը բացասական հսկողության լյումինեսցենտ կորի ամենաբարձր կետից վեր:

4. Որակի վերահսկում

4.1 Բացասական հսկողություն՝ FAM, HEX/VIC ալիքում կամ Ct＞40； Ct արժեք չի հայտնաբերվել

4.2 Դրական հսկողություն՝ FAM, HEX/VIC ալիքով, Ct≤40；

4.3 Վերոնշյալ պահանջները պետք է բավարարվեն նույն փորձի ժամանակ, հակառակ դեպքում թեստի արդյունքներն անվավեր են, և փորձը պետք է կրկնվի:

【Կտրված արժեքը】

Նմուշը համարվում է դրական, երբ՝ Ct≤40 թիրախային հաջորդականություն, Ct≤40 ներքին հսկողության գեն:

【Արդյունքների մեկնաբանություն】

Որակի հսկողությունն անցնելուց հետո օգտվողները պետք է ստուգեն, արդյոք HEX/VIC ալիքում յուրաքանչյուր նմուշի համար կա ուժեղացման կոր, եթե կա և Ct≤40-ով, դա ցույց է տալիս, որ ներքին հսկողության գենը հաջողությամբ ուժեղացվել է, և այս կոնկրետ թեստը վավեր է:Օգտագործողները կարող են անցնել հետագա վերլուծության.

3. Ներքին հսկողության գենի ուժեղացումով նմուշների համար ձախողվեց (HEX/VIC

ալիքը, Ct＞40, կամ ուժեղացման կորի բացակայությունը), ցածր վիրուսային ծանրաբեռնվածությունը կամ PCR ինհիբիտորի առկայությունը կարող է լինել ձախողման պատճառը, հետազոտությունը պետք է կրկնվի նմուշի հավաքածուից.

4. Դրական նմուշների և աճեցված վիրուսի համար ներքին հսկողության արդյունքները չեն ազդում.

Բացասական փորձանմուշների համար ներքին հսկողությունը պետք է դրական փորձարկվի, հակառակ դեպքում ընդհանուր արդյունքը անվավեր է, և փորձաքննությունը պետք է կրկնվի՝ սկսած նմուշների հավաքման փուլից: