Twous deteksyon antikò ki netralize SARS-CoV-2 （ELISA)
【ITILIZ PWOVRE】
Twous deteksyon antikò netralize SARS-CoV-2 se yon tès imunosorban ki lye ak anzim konpetitif (ELISA) ki fèt pou deteksyon kalitatif ak semi-kantitatif nan antikò netralize total pou SARS-CoV-2 nan serom ak plasma imen. Yo ka itilize Twous Deteksyon Antikò Neutralize SARS-CoV-2 kòm yon èd pou idantifye moun ki gen yon repons iminitè adaptab a SARS-CoV-2, ki endike enfeksyon ki sot pase oswa anvan. Yo pa ta dwe itilize twous deteksyon antikò ki netralize SARS-CoV-2 pou fè dyagnostik yon enfeksyon egi SARS-CoV-2.
【ENTWODIKSYON】
Enfeksyon kowonaviris yo anjeneral pwovoke repons antikò netralize. Pousantaj serokonvèsyon nan pasyan COVID-19 yo se 50% ak 100% nan jou 7 ak 14 apre aparisyon sentòm yo, respektivman. Pou prezante konesans, antikò netralize viris ki koresponn nan san se yon rekonèt kòm yon sib pou detèmine efikasite antikò ak pi wo konsantrasyon nan antikò netralize endike pi wo efikasite pwoteksyon. Tès netralizasyon rediksyon plak (PRNT) yo te rekonèt kòm estanda lò pou detekte antikò netralize. Sepandan, akòz debi li yo ki ba ak pi wo kondisyon pou operasyon, PRNT pa pratik pou serodyagnostik gwo echèl ak evalyasyon vaksen. Twous deteksyon antikò netralize SARS-CoV-2 la baze sou metodoloji ELISA (Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), ki ka detekte antikò netralize nan echantiyon san an epi aksede espesyalman nivo konsantrasyon kalite antikò sa a.
【Pwosedi tès la】
1.Nan tib separe, aliquot 120μL nan solisyon an hACE2-HRP prepare.
2.Ajoute 6 μL kalibratè, echantiyon enkoni, kontwòl kalite nan chak tib epi melanje byen.
3.Transfè 100μL nan chak melanj ki prepare nan etap 2 a nan pwi mikwoplak ki koresponn dapre konfigirasyon tès predesine.
3.Kouvri plak la ak Plak Sealer epi enkube nan 37 ° C pou 60 minit.
4.Retire Plak Seal la epi lave plak la ak apeprè 300 μL nan 1× Solisyon Lave pou chak pi pou kat fwa.
5.Tape plak la sou sèvyèt papye pou retire likid rezidyèl nan pwi yo apre etap lave yo.
6.Ajoute 100 μL Solisyon TMB nan chak pi epi enkube plak la nan fè nwa nan 20 - 25 ° C pou 20 minit.
7.Ajoute 50 μL Stop Solution nan chak pi pou sispann reyaksyon an.
8.Li absorbans nan lektè microplate nan 450 nm nan 10 minit (630nm kòm akseswar rekòmande pou pi wo pèfòmans presizyon.
