SARS-COV-2 न्यूट्रलाइज़िंग एंटीबॉडी डिटेक्शन किट and एलिसा)

【उपयोग का उद्देश्य】

SARS-COV-2 न्यूट्रलाइज़िंग एंटीबॉडी डिटेक्शन किट एक प्रतिस्पर्धी एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट परख (ELISA) है जिसका उद्देश्य मानव सीरम और प्लाज्मा में SARS-COV-2 को कुल तटस्थ एंटीबॉडी के गुणात्मक और अर्ध-मात्रात्मक पता लगाने के लिए है। SARS- COV-2 न्यूट्रलाइज़िंग एंटीबॉडी डिटेक्शन किट का उपयोग SARS- COV-2 के लिए एक अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया वाले व्यक्तियों की पहचान करने में सहायता के रूप में किया जा सकता है, जो हाल ही में या पूर्व संक्रमण का संकेत देता है। SARS-COV-2 न्यूट्रलाइजिंग एंटीबॉडी डिटेक्शन किट का उपयोग तीव्र SARS-COV-2 संक्रमण का निदान करने के लिए नहीं किया जाना चाहिए।

【परिचय】

कोरोनवायरस संक्रमण आमतौर पर एंटीबॉडी प्रतिक्रियाओं को बेअसर करने के लिए प्रेरित करते हैं। COVID-19 रोगियों में सेरोकोनवर्जन दर क्रमशः 7 और 14 पोस्ट लक्षण शुरुआत में 50% और 100% है। ज्ञान प्रस्तुत करने के लिए, रक्त में एंटीबॉडी को बेअसर करने वाले वायरस को एंटीबॉडी प्रभावकारिता का निर्धारण करने के लिए एक लक्ष्य के रूप में मान्यता प्राप्त है और तटस्थ एंटीबॉडी की उच्च सांद्रता उच्च सुरक्षा प्रभावकारिता का संकेत देती है। पट्टिका रिडक्शन न्यूट्रलाइज़ेशन टेस्ट (PRNT) को एंटीबॉडी को बेअसर करने के लिए सोने के मानक के रूप में मान्यता दी गई है। हालांकि, ऑपरेशन के लिए इसकी कम थ्रूपुट और उच्च आवश्यकता के कारण, PRNT बड़े पैमाने पर सेरोडायग्नोसिस और वैक्सीन मूल्यांकन के लिए व्यावहारिक नहीं है। SARS-COV-2 न्यूट्रलाइज़िंग एंटीबॉडी डिटेक्शन किट प्रतिस्पर्धी एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉर्बेंट परख (एलिसा) पद्धति पर आधारित है, जो रक्त के नमूने में न्यूट्रलाइजिंग एंटीबॉडी का पता लगा सकता है और साथ ही विशेष रूप से इस प्रकार के एंटीबॉडी के एकाग्रता स्तर तक पहुंच सकता है।

 【परीक्षण प्रक्रिया】

1. अलग-अलग ट्यूबों में, तैयार HACE2-HRP समाधान के विभाजित 120μl।

2. कैलिब्रेटर के 6 μl, अज्ञात नमूने, प्रत्येक ट्यूब में गुणवत्ता नियंत्रण और अच्छी तरह से मिलाएं।

3. पूर्व निर्धारित परीक्षण कॉन्फ़िगरेशन के अनुसार इसी माइक्रोप्लेट कुओं में चरण 2 में तैयार किए गए प्रत्येक मिश्रण के 100μl।

3. प्लेट सीलर के साथ प्लेट को रखें और 60 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें।

4. प्लेट सीलर को रेव करें और चार बार प्रति अच्छी तरह से 1 × वॉश सॉल्यूशन के 300 μL के साथ प्लेट को धो लें।

5. धोने के बाद कुओं में अवशिष्ट तरल को हटाने के लिए कागज तौलिया पर प्लेट को टेप करें।

6. प्रत्येक कुएं के लिए टीएमबी समाधान के 100 μL और 20 मिनट के लिए 20 - 25 डिग्री सेल्सियस पर प्लेट को अंधेरे में ऊष्मायन करें।

प्रतिक्रिया को रोकने के लिए प्रत्येक कुएं को स्टॉप सॉल्यूशन का 7.DD 50 μL।

8. 10 मिनट के भीतर 450 एनएम पर माइक्रोप्लेट रीडर में अवशोषण को पढ़ें (630nm के रूप में गौण उच्च परिशुद्धता प्रदर्शन के लिए अनुशंसित है।