SARS-CoV-2 ન્યુટ્રલાઇઝિંગ એન્ટિબોડી ડિટેક્શન કિટ (ELISA)

【હેતુપૂર્વક ઉપયોગ】

SARS-CoV-2 ન્યુટ્રલાઇઝિંગ એન્ટિબોડી ડિટેક્શન કિટ એ સ્પર્ધાત્મક એન્ઝાઇમ-લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બન્ટ એસે (ELISA) છે જે માનવ સીરમ અને પ્લાઝ્મામાં SARS-CoV-2 માટે કુલ તટસ્થ એન્ટિબોડીઝની ગુણાત્મક અને અર્ધ-માત્રાત્મક તપાસ માટે બનાવાયેલ છે. SARS- CoV-2 ન્યુટ્રલાઇઝિંગ એન્ટિબોડી ડિટેક્શન કિટનો ઉપયોગ SARS- CoV-2 માટે અનુકૂલનશીલ રોગપ્રતિકારક પ્રતિભાવ ધરાવતી વ્યક્તિઓને ઓળખવામાં સહાય તરીકે થઈ શકે છે, જે તાજેતરના અથવા પહેલાના ચેપને દર્શાવે છે. SARS-CoV-2 ન્યુટ્રલાઇઝિંગ એન્ટિબોડી ડિટેક્શન કિટનો ઉપયોગ તીવ્ર SARS-CoV-2 ચેપનું નિદાન કરવા માટે થવો જોઈએ નહીં.

【પરિચય】

કોરોનાવાયરસ ચેપ સામાન્ય રીતે તટસ્થ એન્ટિબોડી પ્રતિભાવોને પ્રેરિત કરે છે. કોવિડ-19 દર્દીઓમાં સેરો કન્વર્ઝન રેટ અનુક્રમે 50% અને 100% લક્ષણોની શરૂઆત પછી 7 અને 14 દિવસે છે. જ્ઞાન પ્રસ્તુત કરવા માટે, રક્તમાં અનુરૂપ વાયરસ તટસ્થ એન્ટિબોડીને એન્ટિબોડીની અસરકારકતા નક્કી કરવા માટેના લક્ષ્ય તરીકે ઓળખવામાં આવે છે અને તટસ્થ એન્ટિબોડીની ઉચ્ચ સાંદ્રતા ઉચ્ચ સુરક્ષા અસરકારકતા દર્શાવે છે. પ્લાક રિડક્શન ન્યુટ્રલાઇઝેશન ટેસ્ટ (PRNT) ને તટસ્થ એન્ટિબોડીઝ શોધવા માટે ગોલ્ડ સ્ટાન્ડર્ડ તરીકે ઓળખવામાં આવે છે. જો કે, તેના નીચા થ્રુપુટ અને ઓપરેશન માટે ઉચ્ચ જરૂરિયાતને કારણે, મોટા પાયે સેરોડાયગ્નોસિસ અને રસીના મૂલ્યાંકન માટે PRNT વ્યવહારુ નથી. SARS-CoV-2 ન્યુટ્રલાઇઝિંગ એન્ટિબોડી ડિટેક્શન કિટ સ્પર્ધાત્મક એન્ઝાઇમ-લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બન્ટ એસે (ELISA) પદ્ધતિ પર આધારિત છે, જે લોહીના નમૂનામાં તટસ્થ એન્ટિબોડી શોધી શકે છે તેમજ આ પ્રકારના એન્ટિબોડીના સાંદ્રતા સ્તરને ખાસ એક્સેસ કરી શકે છે.

 【ટેસ્ટ પ્રક્રિયા】

1.અલગ ટ્યુબમાં, તૈયાર કરેલ hACE2-HRP સોલ્યુશનનું અલીકોટ 120μL.

2.દરેક ટ્યુબમાં 6 μL કેલિબ્રેટર, અજાણ્યા નમૂનાઓ, ગુણવત્તા નિયંત્રણો ઉમેરો અને સારી રીતે ભળી દો.

3. સ્ટેપ 2 માં તૈયાર કરેલ દરેક મિશ્રણના 100μLને અનુરૂપ માઇક્રોપ્લેટ કુવાઓમાં પૂર્વ-ડિઝાઇન કરેલ પરીક્ષણ ગોઠવણી અનુસાર સ્થાનાંતરિત કરો.

3. પ્લેટને પ્લેટ સીલર વડે ઢાંકી દો અને 60 મિનિટ માટે 37°C પર પકાવો.

4. પ્લેટ સીલરને દૂર કરો અને પ્લેટને ચાર વખત કૂવા દીઠ 1× વૉશ સોલ્યુશનના અંદાજિત 300 μL સાથે ધોઈ લો.

5. પગથિયાં ધોયા પછી કૂવામાં રહેલું પ્રવાહી દૂર કરવા માટે કાગળના ટુવાલ પર પ્લેટને ટેપ કરો.

6.દરેક કૂવામાં 100 μL TMB સોલ્યુશન ઉમેરો અને પ્લેટને 20-25°C તાપમાને અંધારામાં 20 મિનિટ માટે ઉકાળો.

7. પ્રતિક્રિયા રોકવા માટે દરેક કૂવામાં 50 μL સ્ટોપ સોલ્યુશન ઉમેરો.

8. 10 મિનિટની અંદર 450 nm પર માઇક્રોપ્લેટ રીડરમાં શોષકતા વાંચો (ઉચ્ચ ચોકસાઇ કામગીરી માટે સહાયક તરીકે 630nm ભલામણ કરવામાં આવે છે.