Pasgan lorgaidh searbhag niuclasach Bhìoras Monkeypox (MPV).

Anns a ’phasgan tha ath-bheachdan airson 48 deuchainn no smachd càileachd a ghiullachd, a’ toirt a-steach na pàirtean a leanas:

Reagent A

Ath-ghnìomhaicheB

Nota: Chan urrainnear na pàirtean de dhiofar àireamhan baidse a chleachdadh gu h-eadar-mhalairteach

【Suidheachadh stòraidh agus beatha sgeilp】

Faodar 1.Reagent A / B a stòradh aig 2-30 ° C, agus tha beatha sgeilp 10 mìosan.

2.Please fosgail còmhdach an tiùba deuchainn a-mhàin nuair a bhios tu deiseil airson an deuchainn.

3. Na cleachd tiùban deuchainn nas fhaide na an ceann-latha crìochnachaidh.

4.Na cleachd tiùb lorgaidh aoidionach.

【Ionnsramaid iomchaidh】

Freagarrach airson Freagarrach airson siostam anailis LC480 PCR, siostam sgrùdaidh PCR fèin-ghluasadach Gentier 48E, siostam anailis ABI7500 PCR.

【Sampall Riatanasan】

Seòrsaichean sampall 1.Applicable: sampallan swabs amhaich.

2.Sampling fuasgladh:Às deidh dearbhadh, thathas a’ moladh an tiùb gleidhidh àbhaisteach saline no bhìoras a chaidh a thoirt a-mach le bith-eòlas Hangzhou Testsea a chleachdadh airson cruinneachadh sampall.

swab amhaich:sguab tonsils pharyngeal dà-thaobhach agus balla pharyngeal posterior le swab samplachaidh sterile cuidhteasach, bog an swab a-steach don tiùb anns a bheil fuasgladh samplachaidh 3mL, cuir às don earball, agus teannachadh còmhdach an tiùba.

3.Sample stòradh agus lìbhrigeadh:Bu chòir na sampallan a thèid a dhearbhadh a dhearbhadh cho luath ‘s a ghabhas.Bu chòir an teòthachd còmhdhail a chumail aig 2 ~ 8 ℃. Faodar na sampallan a thèid a dhearbhadh taobh a-staigh 24 uairean a stòradh aig 2 ℃ ~ 8 ℃ agus mura h-urrainnear na sampallan a dhearbhadh taobh a-staigh 24 uairean, bu chòir a stòradh aig nas lugha na no co-ionann gu -70 ℃ (mura h-eil suidheachadh stòraidh de -70 ℃, faodar a stòradh aig -20 ℃ airson ùine), seachain a-rithist

reòdh agus reòdh.

4. Tha cruinneachadh sampall ceart, stòradh agus còmhdhail deatamach airson coileanadh an toraidh seo.

【Modh deuchainn】

1.Sample giollachd agus sampall a bharrachd

1.1 Samhlachadh giollachd

Às deidh dhut am fuasgladh samplachaidh gu h-àrd a mheasgachadh le sampallan, thoir 30 μL den sampall a-steach don phìob ath-bhualadh sgaoilidh DNA agus measgachadh gu cothromach e.

1.2 A’ luchdachadh

Gabh 20 μL den ath-chruthachadh reagent agus cuir ris an inneal lorg MPV, cuir 5μL den sampall giullachd gu h-àrd (Thèid an smachd adhartach agus an smachd àicheil a phròiseasadh ann an co-shìnte ris na sampallan), còmhdaich caip an tiùba, centrifuge e aig 2000rpm airson 10 diog.

2. Meudachadh PCR

2.1 Luchdaich a ’phlàta / tiùban PCR ullaichte gu inneal fluorescence PCR, thèid smachd àicheil agus smachd adhartach a shuidheachadh airson gach deuchainn.

2.2 suidheachadh sianal fluorescent:

1) Tagh sianal FAM airson lorg MPV ；

2) Tagh sianal HEX / VIC airson lorg gine smachd a-staigh；

3.Results mion-sgrùdadh

Suidhich a 'bhun-loidhne os cionn a' phuing as àirde de lùb flùraiseach an smachd àicheil.

4.Quality smachd

4.1 Smachd àicheil: Cha deach luach Ct a lorg ann am FAM, sianal HEX / VIC, no Ct ＞40；

4.2 Smachd adhartach: Ann am FAM, sianal HEX / VIC, Ct≤40；

4.3 Bu chòir na riatanasan gu h-àrd a bhith riaraichte san aon deuchainn, air neo tha toraidhean an deuchainn neo-dhligheach agus feumar an deuchainn a dhèanamh a-rithist.

【Gearr dheth luach】

Thathas den bheachd gu bheil sampall dearbhach nuair a tha: Sreath targaid Ct≤40, An gine smachd a-staigh Ct≤40.

【Eadar-mhìneachadh nan toraidhean】

Aon uair ‘s gu bheil an smachd càileachd seachad, bu chòir do luchd-cleachdaidh faighinn a-mach a bheil lùb leudachaidh ann airson gach sampall ann an sianal HEX / VIC, ma tha agus le Ct≤40, chomharraich e gu bheil an gine smachd a-staigh air a mheudachadh gu soirbheachail agus gu bheil an deuchainn sònraichte seo dligheach.Faodaidh luchd-cleachdaidh a dhol air adhart gu mion-sgrùdadh leantainneach:

3.Airson sampaill le leudachadh gine in-smachd air fàiligeadh (HEX/VIC

sianal, Ct ＞40, no lùb leudachaidh sam bith), dh’ fhaodadh luchd ìosal viral no gu bheil inneal-dìon PCR a bhith mar adhbhar fàiligeadh, bu chòir an sgrùdadh a-rithist bhon chruinneachadh sampaill;

4.For sampallan dearbhach agus bhìoras cultarach, chan eil buaidh aig toraidhean smachd a-staigh;

Airson sampaill a chaidh a dhearbhadh àicheil, feumar an smachd a-staigh a dhearbhadh gu dearbhach air neo tha an toradh iomlan neo-dhligheach agus feumar an sgrùdadh ath-aithris, a’ tòiseachadh bhon cheum cruinneachadh sampaill.