Kit de détection des acides nucléiques du virus Monkeypox (MPV)

Le kit contient des réactifs pour le traitement de 48 tests ou contrôle qualité, comprenant les composants suivants :

Réactif A

RéactifB

Remarque : les composants de différents numéros de lot ne peuvent pas être utilisés de manière interchangeable

【Conditions de stockage et durée de conservation】

1. Le réactif A/B peut être conservé entre 2 et 30 °C et la durée de conservation est de 10 mois.

2. Veuillez ouvrir le couvercle du tube à essai uniquement lorsque vous êtes prêt pour le test.

3. N'utilisez pas de tubes à essai au-delà de la date de péremption.

4. N'utilisez pas de tube de détection de fuite.

【Instrument applicable】

Convient pour le système d'analyse PCR LC480, le système d'analyse PCR automatique Gentier 48E, le système d'analyse PCR ABI7500.

【Exemples d'exigences】

1.Types d'échantillons applicables: prélèvements de gorge.

2.Solution d'échantillonnage :Après vérification, il est recommandé d'utiliser une solution saline normale ou un tube de conservation des virus produit par Hangzhou Testsea Biology pour le prélèvement d'échantillons.

prélèvement de gorge :essuyez les amygdales pharyngées bilatérales et la paroi pharyngée postérieure avec un écouvillon d'échantillonnage stérile jetable, plongez l'écouvillon dans le tube contenant 3 ml de solution d'échantillonnage, jetez la queue et serrez le couvercle du tube.

3. Stockage et livraison des échantillons :Les échantillons à tester doivent être testés dès que possible.La température de transport doit être maintenue à 2 ~ 8 ℃. Les échantillons qui peuvent être testés dans les 24 heures peuvent être stockés à 2 ℃ ~ 8 ℃ et si les échantillons ne peuvent pas être testés dans les 24 heures, ils doivent être stockés à une température inférieure ou égale. à -70 ℃ (s'il n'y a pas de condition de stockage de -70 ℃, il peut être stocké temporairement à -20 ℃), évitez les répétitions

congélation et décongélation.

4. Un prélèvement, un stockage et un transport appropriés des échantillons sont essentiels à la performance de ce produit.

【Méthode de test】

1. Traitement des échantillons et ajout d’échantillons

1.1 Traitement des échantillons

Après avoir mélangé la solution d'échantillonnage ci-dessus avec les échantillons, prélevez 30 µL de l'échantillon dans le tube de réactif de libération d'ADN et mélangez-le uniformément.

1.2 Chargement

Prenez 20 μL du réactif de reconstitution et ajoutez-le au réactif de détection MPV, ajoutez 5 μL de l'échantillon traité ci-dessus (le contrôle positif et le contrôle négatif doivent être traités en parallèle avec les échantillons), couvrez le bouchon du tube, centrifugez-le à 2000 tr/min pendant 10 secondes.

2. Amplification par PCR

2.1 Chargez la plaque/les tubes PCR préparés dans l'instrument PCR à fluorescence. Un contrôle négatif et un contrôle positif doivent être définis pour chaque test.

2.2 Réglage du canal fluorescent :

1) Choisissez le canal FAM pour la détection MPV ;

2) Choisissez le canal HEX/VIC pour la détection des gènes de contrôle interne ;

3.Analyse des résultats

Réglez la ligne de base au-dessus du point le plus élevé de la courbe fluorescente du contrôle négatif.

4.Contrôle qualité

4.1 Contrôle négatif : aucune valeur Ct détectée dans le canal FAM、HEX/VIC, ou Ct＞40；

4.2 Contrôle positif : dans le canal FAM、HEX/VIC, Ct≤40 ;

4.3 Les exigences ci-dessus doivent être satisfaites dans la même expérience, sinon les résultats du test ne seront pas valides et l'expérience devra être répétée.

【Valeur de coupure】

Un échantillon est considéré comme positif lorsque : La séquence cible Ct≤40, Le gène de contrôle interne Ct≤40.

【Interprétation des résultats】

Une fois le contrôle de qualité réussi, les utilisateurs doivent vérifier s'il existe une courbe d'amplification pour chaque échantillon dans le canal HEX/VIC, s'il y en a et avec Ct≤40, cela indique que le gène de contrôle interne est amplifié avec succès et que ce test particulier est valide.Les utilisateurs peuvent procéder à l'analyse de suivi :

3. Pour les échantillons dont l'amplification du gène de contrôle interne a échoué (HEX/VIC

canal, Ct> 40, ou aucune courbe d'amplification), une faible charge virale ou l'existence d'un inhibiteur de la PCR pourrait être la raison de l'échec, l'examen doit être répété à partir de la collecte d'échantillons ;

4.Pour les échantillons positifs et les virus cultivés, les résultats du contrôle interne n'affectent pas ;

Pour les échantillons testés négatifs, le contrôle interne doit être testé positif, sinon le résultat global n'est pas valide et l'examen doit être répété, en commençant par l'étape de prélèvement des échantillons.