Monkeypox Virus (MPV) -nukleiinihappojen tunnistussarja

Sarja sisältää reagensseja 48 testin käsittelyyn tai laadunvalvontaan, mukaan lukien seuraavat komponentit:

Reagenssi A

ReagenssiB

Huomautus: Eri eränumeroiden komponentteja ei voida käyttää keskenään

【Säilytysolosuhteet ja säilyvyys】

1. Reagenssi A/B voidaan säilyttää 2-30 °C:ssa ja säilyvyysaika on 10 kuukautta.

2.Avaa koeputken kansi vasta, kun olet valmis testiin.

3. Älä käytä koeputkia viimeisen käyttöpäivän jälkeen.

4. Älä käytä vuotavan ilmaisinputkea.

【Sovellettava instrumentti】

Soveltuu Sopii LC480 PCR-analyysijärjestelmään, Gentier 48E automaattiseen PCR-analyysijärjestelmään, ABI7500 PCR-analyysijärjestelmään.

【Esimerkkivaatimukset】

1. Sovellettavat näytetyypit: kurkkupuikkonäytteitä.

2. Näytteenottoratkaisu:Tarkastuksen jälkeen on suositeltavaa käyttää Hangzhou Testsea Biologyn valmistamaa normaalia suolaliuosta tai viruksen säilytysputkea näytteenottoa varten.

kurkkupuikko:pyyhi molemminpuoliset nielurisat ja nielun takaseinä kertakäyttöisellä steriilillä näytteenottopuikolla, upota vanupuikko putkeen, joka sisältää 3 ml näyteliuosta, hävitä häntä ja kiristä putken kansi.

3. Näytteiden varastointi ja toimitus:Testattavat näytteet tulee testata mahdollisimman pian.Kuljetuslämpötila tulee pitää 2-8 ℃:ssa. Näytteet, jotka voidaan testata 24 tunnin sisällä, voidaan säilyttää 2℃~8 ℃:ssa ja jos näytteitä ei voida testata 24 tunnin kuluessa, ne tulee säilyttää alle tai yhtä suuressa lämpötilassa. -70 ℃ (jos varastointiolosuhteita ei ole -70 ℃, sitä voidaan säilyttää -20 ℃ tilapäisesti), vältä toistuvia

pakastaminen ja sulattaminen.

4. Asianmukainen näytteenotto, varastointi ja kuljetus ovat kriittisiä tämän tuotteen suorituskyvyn kannalta.

【Testausmenetelmä】

1. Näytteen käsittely ja näytteen lisääminen

1.1 Näytteen käsittely

Kun yllä oleva näytteenottoliuos on sekoitettu näytteiden kanssa, ota 30 µl näytettä DNA-vapautusreagenssiputkeen ja sekoita tasaisesti.

1.2 Lataus

Ota 20 µl rekonstituointireagenssia ja lisää se MPV-detektioreagenssiin, lisää 5 µl edellä käsiteltyä näytettä (positiivinen kontrolli ja negatiivinen kontrolli käsitellään rinnakkain näytteiden kanssa), peitä putken korkki, sentrifugoi sitä nopeudella 2000 rpm 10 sekuntia.

2. PCR-monistus

2.1 Lataa valmistettu PCR-levy/-putket fluoresenssi-PCR-instrumenttiin. Negatiivinen kontrolli ja positiivinen kontrolli on asetettava jokaista testiä varten.

2.2 Fluoresoivan kanavan asetus:

1) Valitse FAM-kanava MPV-tunnistusta varten；

2) Valitse HEX/VIC-kanava sisäiseen kontrolligeenien havaitsemiseen；

3. Tulosanalyysi

Aseta perusviiva negatiivisen kontrollin fluoresoivan käyrän korkeimman pisteen yläpuolelle.

4. Laadunvalvonta

4.1 Negatiivinen kontrolli: Ct-arvoa ei havaittu FAM-, HEX/VIC-kanavassa tai Ct＞40；

4.2 Positiivinen ohjaus: FAM, HEX/VIC-kanavassa, Ct≤40；

4.3 Yllä olevat vaatimukset tulee täyttää samassa kokeessa, muuten testitulokset ovat virheellisiä ja koe on toistettava.

【Leikkaa arvo】

Näyte katsotaan positiiviseksi, kun: Kohdesekvenssi Ct≤40, Sisäinen kontrolligeeni Ct≤40.

【Tulosten tulkinta】

Kun laadunvalvonta on läpäissyt, käyttäjien tulee tarkistaa, onko jokaiselle HEX/VIC-kanavan näytteelle vahvistuskäyrä, jos sellainen on, ja jos Ct≤40, se osoitti, että sisäinen kontrolligeeni on monistettu onnistuneesti ja tämä testi on kelvollinen.Käyttäjät voivat jatkaa seuranta-analyysiä:

3. Näytteille, joissa sisäisen kontrolligeenin monistus epäonnistui (HEX/VIC

kanava, Ct＞40 tai ei amplifikaatiokäyrää), alhainen viruskuorma tai PCR-estäjän olemassaolo voi olla syynä epäonnistumiseen, tutkimus tulee toistaa näytekeräyksestä;

4.Positiivisille näytteille ja viljellylle virukselle sisäisen valvonnan tulokset eivät vaikuta;

Negatiivisille näytteille sisäinen kontrolli on testattava positiivisesti, muuten kokonaistulos on virheellinen ja tutkimus on toistettava näytteenottovaiheesta alkaen.