کیت تشخیص آنتی بادی SARS-COV-2 （ELISA)

【استفاده در نظر گرفته شده】

کیت تشخیص آنتی بادی خنثی کننده SARS-COV-2 یک روش ایمنی بدن مرتبط با آنزیم (ELISA) است که برای تشخیص کیفی و نیمه کمی آنتی بادی های خنثی کننده کل به SARS-COV-2 در سرم و پلاسما انسان در نظر گرفته شده است. کیت شناسایی آنتی بادی خنثی کننده SARS-COV-2 می تواند به عنوان کمک در شناسایی افراد با پاسخ ایمنی تطبیقی ​​به SARS- COV-2 ، استفاده شود ، که نشان دهنده عفونت اخیر یا قبلی است. کیت تشخیص آنتی بادی خنثی کننده SARS-COV-2 نباید برای تشخیص عفونت حاد SARS-COV-2 استفاده شود.

【مقدمه】

عفونت های Coronavirus به طور معمول پاسخ های آنتی بادی خنثی کننده را القا می کنند. میزان سرور در بیماران COVID-19 به ترتیب در روز 7 و 14 و 14 شروع علائم پس از آن 50 ٪ و 100 ٪ است. برای ارائه دانش ، آنتی بادی خنثی کننده ویروس مربوطه در خون به عنوان یک هدف برای تعیین اثر آنتی بادی و غلظت بالاتر آنتی بادی خنثی کننده نشانگر اثربخشی محافظت بالاتر است. تست خنثی سازی کاهش پلاک (PRNT) به عنوان استاندارد طلا برای تشخیص آنتی بادی های خنثی کننده شناخته شده است. با این حال ، به دلیل کمترین توان و نیاز بالاتر برای کار ، PRNT برای سرود تشخیصی در مقیاس بزرگ و ارزیابی واکسن عملی نیست. کیت تشخیص آنتی بادی خنثی کننده SARS-COV-2 مبتنی بر روش سنجش ایمنی با آنزیم مرتبط با آنزیم (ELISA) است که می تواند آنتی بادی خنثی کننده را در نمونه خون تشخیص دهد و همچنین به طور خاص به سطح غلظت این نوع آنتی بادی دسترسی پیدا کند.

 【روش آزمایش】

1. در لوله های جداگانه ، 120μl از محلول آماده شده HACE2-HRP.

2. add 6 میکرولیتر از کالیبراسیون ، نمونه های ناشناخته ، کنترل کیفیت در هر لوله و خوب مخلوط کنید.

3.Transfer 100μl از هر مخلوط تهیه شده در مرحله 2 به چاههای میکروپلیت مربوطه با توجه به پیکربندی تست از پیش تعیین شده.

3. صفحه را با مهر و موم بشقاب ذخیره کرده و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 60 دقیقه انکوبه کنید.

4. مهر و موم صفحه را دوباره تهیه کرده و صفحه را با تقریبی 300 میکرولیتر محلول شستشوی 1 × در هر چاه برای چهار بار بشویید.

5. صفحه را روی حوله کاغذی قرار دهید تا مایع باقیمانده در چاه ها پس از شستشو از بین برود.

6.DD 100 میکرولیتر از محلول TMB برای هر چاه و صفحه را در تاریکی در دمای 20 - 25 درجه سانتیگراد به مدت 20 دقیقه انکوبه کنید.

7. ADD 50 میکرولیتر از محلول توقف برای هر چاه برای متوقف کردن واکنش.

8. جذب در میکروپلیت خوان در 450 نانومتر در طی 10 دقیقه (630 نیوتن متر به عنوان لوازم جانبی برای عملکرد دقیق بالاتر توصیه می شود.