SARS-CoV-2 antigorputz neutralizatzaileak detektatzeko kit (ELISA)
【AURRERA ERABILERA】
SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit (ELISA) Entzimekin Lotutako Immunosorbent Sasay (ELISA) lehiakorra da, giza serum eta plasman SARS-CoV-2 aurkako antigorputz neutralizatzaile totalak detektatzeko xedea kualitatibo eta erdi-kuantitatiboan. SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit laguntza gisa erabil daiteke SARS-CoV-2arekiko erantzun immune moldagarria duten pertsonak identifikatzeko, duela gutxi edo aurreko infekzioa adieraziz. SARS-CoV-2 Antigorputz Neutralizatzaileak detektatzeko Kita ez da SARS-CoV-2 infekzio akutua diagnostikatzeko erabili behar.
【SARRERA】
Coronavirus infekzioek normalean antigorputz neutralizatzaileak eragiten dituzte. COVID-19 gaixoen serokonbertsio-tasak % 50 eta % 100ekoa dira sintomak agertu ondorengo 7. eta 14. egunean, hurrenez hurren. Ezagutza aurkezteko, odolean dagoen birusen antigorputz neutralizatzaile bat antigorputzen eraginkortasuna zehazteko helburu gisa aitortzen da eta antigorputz neutralizatzaileen kontzentrazio handiagoak babes-eraginkortasun handiagoa adierazten du. Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) antigorputz neutralizatzaileak detektatzeko urrezko estandar gisa aitortzen ari da. Hala ere, bere errendimendu txikia eta funtzionamendurako eskakizun handiagoa dela eta, PRNT ez da praktikoa eskala handiko serodiagnostikorako eta txertoen ebaluaziorako. SARS-CoV-2 Antigorputz Neutralizatzaileak Detektatzeko Kita Entzimekin Lotutako Immunosorbent Saia Lehiakorrerako (ELISA) metodologian oinarritzen da, antigorputz neutralizatzailea odol laginean detektatzeko eta antigorputz mota honen kontzentrazio-mailetara bereziki atzitzeko.
【Prozedura Prozedura】
1.Hodi bereizietan, prestatutako hACE2-HRP disoluzioaren 120μL alikuota.
2.Hodi bakoitzean 6 μL kalibragailuak, lagin ezezagunak, kalitate kontrolak gehitu eta ondo nahastu.
3. Transferitu 2. urratsean prestatutako nahasketa bakoitzaren 100μL dagozkion mikroplaken putzuetara, aurrez diseinatutako proba-konfigurazioaren arabera.
3. Estali plaka Plate Sealer-ekin eta inkubatu 37 °C-tan 60 minutuz.
4.Kendu Plate Sealer eta garbitu plaka gutxi gorabehera 300 μL 1× Garbitu Disoluzioarekin putzu bakoitzeko lau aldiz.
5.Ukitu plaka paperezko eskuoihalaren gainean, garbiketa-urratsen ondoren putzuetan dagoen likidoa kentzeko.
6.Gehitu 100 μL TMB soluzio putzu bakoitzean eta plaka ilunpean inkubatu 20 – 25 °C-tan 20 minutuz.
7.Gehitu 50 μL Stop Solution putzu bakoitzean erreakzioa geldiarazteko.
8. Irakurri mikroplaken irakurgailuaren absorbantzia 450 nm-an 10 minutuko epean (630 nm osagarri gisa gomendatzen da doitasun handiagoko errendimendurako.
