SARS-COV-2 neutraliseeriv antikehade tuvastamise komplekt （ELISA)
【Kavandatud kasutamine】
SARS-COV-2 neutraliseeriva antikehade tuvastamise komplekt on konkurentsivõimeline ensüümiga seotud immunosorbendi test (ELISA), mis on mõeldud kvalitatiivseks ja poolkvantitatiivseks tuvastamiseks SARS-COV-2 kogu neutraliseerivate antikehade kogu neutraliseerivaks tuvastamiseks inimese seerumis ja plasmas. SARS-COV-2 neutraliseeriva antikehade tuvastamise komplekti saab kasutada abiks indiviidide tuvastamisel, kellel on SARS-COV-2 adaptiivne immuunvastus, mis näitab hiljutisi või eelnevat nakkust. SARS-COV-2 neutraliseeriva antikehade tuvastamise komplekti ei tohiks kasutada ägeda SARS-COV-2 nakkuse diagnoosimiseks.
【Sissejuhatus】
Koronaviiruse nakkused indutseerivad tavaliselt neutraliseerivaid antikehade vastuseid. Serokonversiooni määr Covid-19 patsientidel on vastavalt 7. ja 14. päeval pärast sümptomi algust 100% ja 100%. Teadmiste esitamiseks on vastav viiruse neutraliseeriv antikeha veres tunnustatud antikehade efektiivsuse määramise ja neutraliseeriva antikeha kõrgema kontsentratsiooni sihtmärgiks näitavad suuremat kaitse efektiivsust. Naastude redutseerimise neutraliseerimise testi (PRNT) on tunnistatud neutraliseerivate antikehade tuvastamise kuldstandardina. Kuid madala läbilaskevõime ja suurema töövajaduse tõttu pole PRNT otstarbekas serodiagnostika ja vaktsiinide hindamise jaoks otstarbekas. SARS-COV-2 neutraliseeriva antikehade tuvastamise komplekt põhineb konkureerivatel ensüümidega seotud immunosorbendi testi (ELISA) metoodikal, mis suudab tuvastada vereproovi neutraliseeriva antikeha, samuti juurdepääsu spetsiaalselt seda tüüpi antikehade kontsentratsioonitasemele.
【Katseprotseduur】
1. Eraldi torudes, alikvoot 120 μl ettevalmistatud HACE2-HRP lahust.
2.Add 6 μl kalibraatoreid, tundmatuid proove, igas torus kvaliteedikontroll ja segage hästi.
3. Transferge 100 μl iga segu, mis on valmistatud 2. etapis vastavatesse mikroplaadi süvenditesse vastavalt eelnevalt kujundatud testi konfiguratsioonile.
3. Kaldage plaat plaadi tihendiga ja inkubeerige temperatuuril 37 ° C 60 minutit.
4. Emuleerige plaadi tihendaja ja peske plaat ligikaudse 300 μl 1x pesulahusega kaevu kohta neli korda.
5.Kasutage plaat paberrätikul, et eemaldada pärast sammude pesemist kaevudest jääkvedelik.
6.Add 100 μl TMB lahust igasse süvendisse ja inkubeerige plaati pimedas temperatuuril 20–25 ° C 20 minutit.
7.Add reaktsiooni peatamiseks 50 μl stopplahust igale kaevu.
8. Lugege mikroplaadilugeja neeldumine 10 minuti jooksul 450 nm juures (630 nm aksessuaar on soovitatav suurema täpsuse jõudluse tagamiseks.
