Kit de detección de anticuerpos neutralizantes de SARS-CoV-2 （Elisa)
【Uso previsto】
El kit de detección de anticuerpos neutralizantes SARS-CoV-2 es un ensayo inmunosorbente ligado a enzimas competitivos (ELISA) destinado a una detección cualitativa y semicuantitativa de anticuerpos neutralizantes totales a SARS-CoV-2 en suero y plasma humanos. El kit de detección de anticuerpos neutralizantes SARS-CoV-2 se puede utilizar como una ayuda para identificar a individuos con una respuesta inmune adaptativa a SARS-CoV-2, que indica una infección reciente o previa. El kit de detección de anticuerpos neutralizantes SARS-CoV-2 no debe usarse para diagnosticar la infección aguda SARS-CoV-2.
【INTRODUCCIÓN】
Las infecciones por coronavirus típicamente inducen respuestas de anticuerpos neutralizantes. Las tasas de seroconversión en los pacientes con CoVID-19 son 50% y 100% en el día 7 y 14 después del inicio de los síntomas, respectivamente. Para presentar el conocimiento, el anticuerpo neutralizante del virus correspondiente en la sangre es un objetivo como un objetivo para determinar la eficacia del anticuerpo y una mayor concentración del anticuerpo neutralizante indican una mayor eficacia de protección. La prueba de neutralización de reducción de la placa (PRNT) se ha reconocido como el estándar de oro para detectar anticuerpos neutralizantes. Sin embargo, debido a su bajo rendimiento y un mayor requisito de operación, la PRNT no es práctica para el diagnóstico a gran escala y la evaluación de la vacuna. El kit de detección de anticuerpos neutralizantes SARS-CoV-2 se basa en una metodología de ensayo de inmunosorbentes ligado a enzimas competitivos (ELISA), que puede detectar el anticuerpo neutralizante en la muestra de sangre, así como acceder especialmente a los niveles de concentración de este tipo de anticuerpo.
【Procedimiento de prueba】
1. En tubos separados, alícuota 120 μl de la solución HACE2-HRP preparada.
2. Agregue 6 μl de calibradores, muestras desconocidas, controles de calidad en cada tubo y mezcle bien.
3. Transferir 100 μl de cada mezcla preparada en el paso 2 en los pozos de microplacas correspondientes de acuerdo con la configuración de prueba prediseñada.
3.Cuble la placa con sellador de placa e incube a 37 ° C durante 60 minutos.
4. Retire el sellador de la placa y lave la placa con 300 μl de solución 1 × de lavado por pozo durante cuatro veces.
5. Tapa la placa sobre la toalla de papel para eliminar el líquido residual en los pozos después de lavar los escalones.
6. Agregue 100 μl de solución TMB a cada pocillo e incuban la placa en la oscuridad a 20 - 25 ° C durante 20 minutos.
7. Agregue 50 μl de solución de parada a cada pozo para detener la reacción.
8. Realice la absorbancia en el lector de microplacas a 450 nm en 10 minutos (630 nm como accesorio se recomienda para un mayor rendimiento de precisión.
