SARS-CoV-2 Neŭtraliga Antikorpa Detekta Ilaro (ELISA)
【INTENCA UZO】
SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit estas Konkurenciva Enzim-Linked Imunosorbent Assay (ELISA) destinita por kvalita kaj duonkvanta detekto de totalaj neŭtraligaj antikorpoj al SARS-CoV-2 en homa serumo kaj plasmo. La Neŭtraliganta Antikorpa Detektado de SARS-CoV-2 povas esti uzata kiel helpo por identigi individuojn kun adapta imuna respondo al SARS-CoV-2, indikante lastatempan aŭ antaŭan infekton. La Neŭtraliga Antikorpa Detekta Ilaro ne devas esti uzata por diagnozi akran infekton de SARS-CoV-2.
【ENKONDUKO】
Koronavirusaj infektoj kutime induktas neŭtraligajn antikorpajn respondojn. La serokonvertaj indicoj en pacientoj kun COVID-19 estas 50% kaj 100% en la tago 7 kaj 14 post simptomo-komenco, respektive. Por prezenti scion, responda virusa neŭtraliga antikorpo en sango estas rekonita kiel celo por determini antikorpefikecon kaj pli alta koncentriĝo de la neŭtraliga antikorpo indikas pli altan protektan efikecon. Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) estis rekonita kiel la ora normo por detektado de neŭtraligaj antikorpoj. Tamen, pro ĝia malalta trafluo kaj pli alta postulo por operacio, PRNT ne estas praktika por grandskala serodiagnozo kaj vakcina taksado. La Neŭtraliganta Antikorpa Detektado de SARS-CoV-2 baziĝas sur Konkurenciva Enzimo-Ligita Imunosorba Testo (ELISA), kiu povas detekti la neŭtraligan antikorpon en sangospecimeno kaj speciale aliri la koncentriĝajn nivelojn de ĉi tiu tipo de antikorpo.
【Proceduro】
1.En apartaj tuboj, alikvoto 120μL de la preta hACE2-HRP Solvo.
2.Aldonu 6 μL da kalibriloj, nekonataj specimenoj, kvalitkontroloj en ĉiu tubo kaj miksu bone.
3.Transloki 100μL de ĉiu miksaĵo preparita en la paŝo 2 en respondajn mikroplatajn putojn laŭ antaŭdezajnita testa agordo.
3.Kovru la teleron per Plate Sealer kaj kovu je 37 °C dum 60 minutoj.
4.Forigu la Platan Sigelilon kaj lavu la teleron per ĉirkaŭ 300 μL de 1× Lava Solvo per puto kvar fojojn.
5.Frapu la teleron sur papera tuko por forigi restan likvaĵon en la putoj post lavado de paŝoj.
6.Aldonu 100 μL da TMB-Solvo al ĉiu puto kaj kovu la teleron en mallumo je 20 - 25 °C dum 20 minutoj.
7.Aldonu 50 μL da Halta Solvo al ĉiu puto por ĉesigi la reagon.
8.Legu la absorbadon en mikroplata leganto ĉe 450 nm ene de 10 minutoj (630nm kiel akcesoraĵo estas rekomendita por pli alta precizeca agado.
