Monkeypox Virus (MPV) Nukleika Acida Detekta Ilaro

La ilaro enhavas reakcilojn por prilaborado de 48 testoj aŭ kvalitkontrolo, inkluzive de la sekvaj komponentoj:

Reakciilo A

ReakciiloB

Noto: La komponantoj de malsamaj aroj ne povas esti uzataj interŝanĝeble

【Kondiĉoj de Stokado kaj Konservado】

1.Reagent A/B povas esti stokita je 2-30 °C, kaj la breta vivo estas 10 monatoj.

2.Bonvolu malfermi la provtuban kovrilon nur kiam vi estas preta por la testo.

3.Ne uzu provtubojn preter la limdato.

4.Ne uzu likan detektan tubon.

【Aplika Instrumento】

Taŭga por Taŭga por LC480 PCR analizsistemo, Gentier 48E Aŭtomata PCR analizsistemo, ABI7500 PCR analizsistemo.

【Specimenaj Postuloj】

1.Applicable specimenaj tipoj: gorĝaj ŝumoj specimenoj.

2.Sampling solvo:Post konfirmo, oni rekomendas uzi normalan salon aŭ Virus-konservan tubon produktitan de Hangzhou Testsea-biologio por specimena kolekto.

gorĝa swab:Viŝu duflankajn faringajn tonsilojn kaj malantaŭan faringan muron per forĵetebla sterila specimena lampo, mergu la swavon en la tubon enhavantan 3mL-specimensolvon, forĵetu la voston kaj streĉu la tubkovrilon.

3.Sample stokado kaj livero:La provaj specimenoj devas esti provitaj kiel eble plej baldaŭ.La transporta temperaturo devas esti konservita je 2 ~ 8 ℃. La specimenoj kiuj povas esti provitaj ene de 24 horoj povas esti stokitaj je 2 ℃ ~ 8 ℃ kaj se la specimenoj ne povas esti provitaj ene de 24 horoj, ĝi devus esti konservita je malpli ol aŭ egala. al -70 ℃ (se ne ekzistas konserva kondiĉo de -70 ℃, ĝi povas esti stokita ĉe -20 ℃ provizore), evitu ripetiĝon

frostiĝado kaj degelo.

4.Ĝusta specimena kolekto, stokado kaj transportado estas kritikaj por la agado de ĉi tiu produkto.

【Testa Metodo】

1.Sample prilaborado kaj specimena aldono

1.1 Specimena prilaborado

Miksinte la supran specimenan solvon kun specimenoj, prenu 30μL de la specimeno en la DNA-eldonan reakcigan tubon kaj miksu ĝin egale.

1.2 Ŝargado

Prenu 20μL de la reakciilo de rekonstruo kaj aldonu ĝin al la MPV-detekta reakciilo, aldonu 5μL de la supre prilaborita specimeno (La pozitiva kontrolo kaj negativa kontrolo estos procesitaj paralele kun la specimenoj), kovru la tuban ĉapon, centrifugu ĝin je 2000rpm por 10. sekundoj.

2. PCR plifortigo

2.1 Ŝarĝu la pretajn PCR-platojn/tubojn al la fluoreskeca PCR-instrumento, Negativa kontrolo kaj pozitiva kontrolo devas esti agordita por ĉiu testo.

2.2 Fluoreska kanala agordo:

1) Elektu FAM-kanalon por MPV-detekto;

2) Elektu HEX/VIC-kanalon por interna kontrola geno-detekto;

3.Analizo de rezultoj

Fiksu la bazlinion super la plej alta punkto de la fluoreska kurbo de la negativa kontrolo.

4.Kvalita kontrolo

4.1 Negativa kontrolo: Neniu Ct-valoro detektita en FAM、HEX/VIC-kanalo, aŭ Ct＞40；

4.2 Pozitiva kontrolo: En FAM、HEX/VIC-kanalo, Ct≤40；

4.3 La supraj postuloj devas esti kontentigitaj en la sama eksperimento, alie la testrezultoj estas nevalidaj kaj la eksperimento devas esti ripetita.

【Detranĉu valoron】

Provaĵo estas konsiderata kiel pozitiva kiam: Cel-sekvenco Ct≤40, La interna kontrola geno Ct≤40.

【Rezulta interpreto】

Post kiam la kvalito-kontrolo estas trapasita, uzantoj devus kontroli ĉu ekzistas plifortiga kurbo por ĉiu specimeno en HEX/VIC-kanalo, se ekzistas kaj kun Ct≤40, ĝi indikis ke la interna kontrola geno estas sukcese plifortigita kaj ĉi tiu aparta testo validas.Uzantoj povas daŭrigi la sekvan analizon:

3.Por specimenoj kun la plifortigo de interna kontrola geno malsukcesis (HEX/VIC

kanalo, Ct＞40, aŭ neniu plifortiga kurbo), malalta Viralŝarĝo aŭ la ekzisto de PCR-inhibitoro povus esti la kialo de fiasko, la ekzameno devus ripetita de la specimena kolekto;

4.Por pozitivaj specimenoj kaj kulturita viruso, la rezultoj de interna kontrolo ne influas;

Por specimenoj testitaj negativaj, la interna kontrolo devas esti provita pozitiva alie la ĝenerala rezulto estas malvalida kaj la ekzameno devas esti ripetita, komencante de la specimena kolekta paŝo.