Κιτ ανίχνευσης αντισώματος SARS-COV-2 (ELISA)
【Προβλεπόμενη χρήση】
Το κιτ ανίχνευσης αντισώματος SARS-CoV-2 είναι ένα ανταγωνιστικό ενζυμικό ανοσοπροσροφητικό δοκιμασία (ELISA) που προορίζεται για ποιοτική και ημι-ποσοτική ανίχνευση ολικών εξουδετερωτικών αντισωμάτων σε SARS-COV-2 στον ανθρώπινο ορό και το πλάσμα. Το κιτ ανίχνευσης αντισώματος SARS-COV-2 μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως βοήθεια για τον εντοπισμό ατόμων με προσαρμοστική ανοσοαπόκριση στο SARS-COV-2, υποδεικνύοντας πρόσφατη ή προηγούμενη μόλυνση. Το κιτ ανίχνευσης αντισώματος SARS-COV-2 δεν πρέπει να χρησιμοποιείται για τη διάγνωση οξείας λοίμωξης SARS-COV-2.
【ΕΙΣΑΓΩΓΗ】
Οι λοιμώξεις του κοράνιου συνήθως προκαλούν αποκρίσεις εξουδετερωτικών αντισωμάτων. Τα ποσοστά ορομετατροπής σε ασθενείς με CoVID-19 είναι 50% και 100% την ημέρα 7 και 14 μετά το σύμπτωμα, αντίστοιχα. Για την παρουσίαση της γνώσης, το αντίστοιχο αντίσωμα εξουδετέρωσης του ιού στο αίμα είναι αναγνωρισμένος ως στόχος για τον προσδιορισμό της αποτελεσματικότητας των αντισωμάτων και της υψηλότερης συγκέντρωσης του εξουδετερωτικού αντισώματος υποδεικνύουν υψηλότερη αποτελεσματικότητα προστασίας. Η δοκιμή εξουδετέρωσης της μείωσης της πλάκας (PRNT) έχει αναγνωριστεί ως το χρυσό πρότυπο για την ανίχνευση εξουδετέρων αντισωμάτων. Ωστόσο, λόγω της χαμηλής απόδοσης και της υψηλότερης απαίτησης για λειτουργία, η PRNT δεν είναι πρακτική για τη σεροδιαγνωστική διάγνωση μεγάλης κλίμακας και την αξιολόγηση του εμβολίου. Το κιτ ανίχνευσης αντισώματος SARS-CoV-2 βασίζεται σε μεθοδολογία ανταγωνιστικής ανοσοπροσροφητικής ανάλυσης (ELISA), η οποία μπορεί να ανιχνεύσει το εξουδετερωτικό αντίσωμα στο δείγμα αίματος καθώς και ειδικά πρόσβαση στα επίπεδα συγκέντρωσης αυτού του τύπου αντισώματος.
【Διαδικασία δοκιμής】
1. Σε ξεχωριστούς σωλήνες, δείγμα 120μL του παρασκευασμένου διαλύματος HACE2-HRP.
2. Προσθέστε 6 μΐ βαθμονομητών, άγνωστα δείγματα, ποιοτικούς ελέγχους σε κάθε σωλήνα και ανακατέψτε καλά.
3. Μεταφορά 100 μΐ κάθε μίγματος που παρασκευάστηκε στο βήμα 2 σε αντίστοιχα φρεάτια μικροπλάνων σύμφωνα με τη διαμόρφωση δοκιμής Prencesigned.
3. Καλύψτε την πλάκα με στεγανοποιητή πλάκας και επωάστε στους 37 ° C για 60 λεπτά.
4. Ρίξτε το σφραγιστικό πλάκας και πλύνετε την πλάκα με κατά προσέγγιση 300 μΐ διαλύματος 1χ πλύσης ανά φρεάτιο για τέσσερις φορές.
5. Βγάλτε την πλάκα σε χαρτοπετσέτα για να αφαιρέσετε το υπολειμματικό υγρό στα πηγάδια μετά το πλύσιμο.
6. Προσθέστε 100 μΐ διαλύματος TMB σε κάθε φρεάτιο και επωάστε την πλάκα σε σκοτάδι στους 20 - 25 ° C για 20 λεπτά.
7. Προσθέστε 50 μΐ διαλύματος στάσης σε κάθε φρεάτιο για να σταματήσετε την αντίδραση.
8. Ανακαλύψτε την απορρόφηση στον αναγνώστη μικροπλακών στα 450 nm εντός 10 λεπτών (630nm ως αξεσουάρ συνιστάται για υψηλότερη απόδοση ακριβείας.