SARS-CoV-2 neutraliserende antistofdetektionskit (ELISA)
【TILSIGTET BRUG】
SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit er en Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) beregnet til kvalitativ og semikvantitativ påvisning af total neutraliserende antistoffer mod SARS-CoV-2 i humant serum og plasma. SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit kan bruges som en hjælp til at identificere individer med et adaptivt immunrespons på SARS-CoV-2, hvilket indikerer nylig eller tidligere infektion. SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit bør ikke bruges til at diagnosticere akut SARS-CoV-2-infektion.
【INDLEDNING】
Coronavirus-infektioner inducerer typisk neutraliserende antistofresponser. Serokonversionsraterne hos COVID-19-patienter er henholdsvis 50 % og 100 % på dag 7 og 14 efter symptomdebut. For at præsentere viden er tilsvarende virusneutraliserende antistof i blod anerkendt som et mål for bestemmelse af antistofeffektivitet, og højere koncentration af det neutraliserende antistof indikerer højere beskyttelseseffektivitet. Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) er blevet anerkendt som guldstandarden til påvisning af neutraliserende antistoffer. Men på grund af dets lave gennemløb og højere krav til drift er PRNT ikke praktisk til storskala serodiagnose og vaccineevaluering. SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit er baseret på Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) metodologi, som kan detektere det neutraliserende antistof i blodprøven samt specielt få adgang til koncentrationsniveauerne af denne type antistof.
【Testprocedure】
1.I separate rør, alikvoter 120μL af den forberedte hACE2-HRP-opløsning.
2. Tilsæt 6 μL kalibratorer, ukendte prøver, kvalitetskontroller i hvert rør og bland godt.
3. Overfør 100 μL af hver blanding fremstillet i trin 2 til tilsvarende mikropladebrønde i henhold til den foruddesignede testkonfiguration.
3.Dæk pladen med Plade Sealer og inkuber ved 37°C i 60 minutter.
4. Fjern pladeforsegleren, og vask pladen med ca. 300 μL 1× vaskeopløsning pr. brønd i fire gange.
5. Bank pladen på køkkenrulle for at fjerne resterende væske i brøndene efter vasketrin.
6. Tilsæt 100 μL TMB-opløsning til hver brønd, og inkuber pladen i mørke ved 20 – 25°C i 20 minutter.
7. Tilsæt 50 μL stopopløsning til hver brønd for at stoppe reaktionen.
8. Aflæs absorbansen i mikropladelæseren ved 450 nm inden for 10 minutter (630 nm som tilbehør anbefales for at opnå højere præcision.
