Pecyn Canfod Gwrthgyrff Niwtraleiddio SARS-CoV-2 (ELISA)
【DEFNYDD A FWRIADIR】
Mae Pecyn Canfod Gwrthgyrff Niwtraleiddio SARS-CoV-2 yn Assay Imiwnosorbent Cystadleuol Cysylltiedig ag Ensym (ELISA) a fwriedir ar gyfer canfod ansoddol a lled-feintiol o gyfanswm gwrthgyrff niwtraleiddio i SARS-CoV-2 mewn serwm dynol a phlasma. Gellir defnyddio Pecyn Canfod Gwrthgyrff Niwtraleiddio SARS-CoV-2 fel cymorth i adnabod unigolion ag ymateb imiwn addasol i SARS-CoV-2, gan nodi haint diweddar neu flaenorol. Ni ddylid defnyddio Pecyn Canfod Gwrthgyrff Niwtraleiddio SARS-CoV-2 i wneud diagnosis o haint SARS-CoV-2 acíwt.
【RHAGARWEINIAD】
Mae heintiau coronafirws fel arfer yn ysgogi ymatebion gwrthgyrff niwtraleiddio. Y cyfraddau serodrosi mewn cleifion COVID-19 yw 50% a 100% ar ddiwrnod 7 a 14 ar ôl i'r symptom ddechrau, yn y drefn honno. I gyflwyno gwybodaeth, mae gwrthgorff niwtraleiddio firws cyfatebol mewn gwaed yn cael ei gydnabod fel targed ar gyfer pennu effeithiolrwydd gwrthgorff ac mae crynodiad uwch o'r gwrthgorff niwtraleiddio yn nodi effeithiolrwydd amddiffyn uwch. Mae Prawf Niwtraleiddio Lleihau Plac (PRNT) wedi cael ei gydnabod fel y safon aur ar gyfer canfod gwrthgyrff niwtraleiddio. Fodd bynnag, oherwydd ei drwybwn isel a gofyniad uwch ar gyfer gweithredu, nid yw PRNT yn ymarferol ar gyfer serodiagnosis ar raddfa fawr a gwerthuso brechlyn. Mae Pecyn Canfod Gwrthgyrff Niwtraleiddio SARS-CoV-2 yn seiliedig ar fethodoleg Assay Imiwnoorbent Cysylltiedig ag Ensym (ELISA) Cystadleuol, a all ganfod y gwrthgorff niwtraleiddio mewn sampl gwaed yn ogystal â chael mynediad arbennig at lefelau crynodiad y math hwn o wrthgorff.
【Gweithdrefn Prawf】
1.Mewn tiwbiau ar wahân, aliquot 120μL o'r Datrysiad hACE2-HRP a baratowyd.
2.Ychwanegwch 6 μL o galibrawyr, samplau anhysbys, rheolaethau ansawdd ym mhob tiwb a chymysgwch yn dda.
3.Transfer 100μL o bob cymysgedd a baratowyd yn y cam 2 i mewn i ffynhonnau microplate cyfatebol yn ôl ffurfweddiad prawf predesigned.
3.Gorchuddiwch y plât gyda Plate Sealer a deorwch ar 37°C am 60 munud.
4.Tynnwch y Sealer Plât a golchwch y plât gyda tua 300 μL o 1 × Ateb Golchwch fesul ffynnon am bedair gwaith.
5.Tapiwch y plât ar dywel papur i gael gwared â hylif gweddilliol yn y ffynhonnau ar ôl golchi camau.
6.Ychwanegwch 100 μL o TMB Solution at bob ffynnon a deorwch y plât yn y tywyllwch ar 20 – 25°C am 20 munud.
7.Ychwanegwch 50 μL o Stop Ateb i bob ffynnon i atal yr adwaith.
8.Darllenwch yr amsugnedd mewn darllenydd microplate ar 450 nm o fewn 10 munud (630nm fel affeithiwr yn cael ei argymell ar gyfer perfformiad manwl uwch.