Kit di rilevazione di anticorpi neutralizzanti SARS-CoV-2 (ELISA)
【USU PUNTU】
U Kit di Rilevazione di Anticorpi Neutralizzanti SARS-CoV-2 hè un Test Immunosorbente Enzyme-Linked Competitivu (ELISA) destinatu à a rilevazione qualitativa è semi-quantitativa di l'anticorpi neutralizzanti totali à SARS-CoV-2 in siero è plasma umanu. U SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit pò esse usatu cum'è aiutu à identificà individui cù una risposta immune adattativa à SARS-CoV-2, chì indica una infezione recente o precedente. U SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit ùn deve esse usatu per diagnosticà l'infezione aguda SARS-CoV-2.
【INTRODUZIONE】
L'infezioni da coronavirus inducenu tipicamente risposte di anticorpi neutralizzanti. I tassi di seroconversione in i pazienti COVID-19 sò 50% è 100% u ghjornu 7 è 14 dopu l'iniziu di i sintomi, rispettivamente. Per prisentà a cunniscenza, l'anticorpu neutralizzante di u virus in u sangue hè ricunnisciutu cum'è un mira per determinà l'efficacità di l'anticorpu è a concentrazione più alta di l'anticorpu neutralizzante indica una efficacità di prutezzione più alta. Test di Neutralizazione di Riduzzione di Plaque (PRNT) hè statu ricunnisciutu cum'è u standard d'oru per a rilevazione di anticorpi neutralizzanti. Tuttavia, per via di u so bassu throughput è più altu requisitu per u funziunamentu, PRNT ùn hè micca praticu per a serodiagnosis à grande scala è a valutazione di vaccini. U SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit hè basatu annantu à a metodulugia di l'Analisi Immunosorbente Enzyme-Linked Competitive (ELISA), chì pò detectà l'anticorpu neutralizzante in mostra di sangue è accede in particulare à i livelli di cuncentrazione di stu tipu d'anticorpu.
【Prucedura di prova】
1.In tubi separati, aliquot 120μL di a Soluzione hACE2-HRP preparata.
2.Add 6 μL di calibrators, campioni scunnisciuti, cuntrolli di qualità in ogni tubu è mischjà bè.
3.Transfer 100μL di ogni mistura preparata in u passu 2 in i pozzi di microplate currispondenti secondu a cunfigurazione di teste predefinita.
3.Cover the plate with Plate Sealer è incubate à 37 ° C per 60 minuti.
4.Remove u Plate Sealer è lavate a piastra cù circa 300 μL di 1× Soluzione di Lavà per pozzu per quattru volte.
5.Tap the plate on paper towel per caccià u liquidu residuale in i pozzi dopu à i passi di lavà.
6.Add 100 μL di Soluzione TMB à ogni pozzu è incubate a piastra in u scuru à 20 - 25 ° C per 20 minuti.
7.Add 50 μL di Stop Solution à ogni pozzu per piantà a reazione.
8.Leghjite l'assorbanza in u lettore di microplate à 450 nm in 10 minuti (630nm cum'è accessori hè cunsigliatu per un rendimentu di precisione più altu.
