Kit di rilevazione di l'acidu nucleicu Monkeypox Virus (MPV).

U kit cuntene reagenti per processà 48 teste o cuntrollu di qualità, cumprese i seguenti cumpunenti:

Reagent A

ReagenteB

Nota: I cumpunenti di diversi numeri di batch ùn ponu micca esse utilizati in modu intercambiable

【Cundizioni di almacenamentu è vita di conservazione】

1.Reagent A / B pò esse guardatu à 2-30 ° C, è a vita di a vita hè di 10 mesi.

2.Please apre a tappa di u tubu di prova solu quandu site prontu per a prova.

3.Do micca aduprà tubi di prova fora di a data di scadenza.

4.Do Ùn aduprate un tubu di dittizzioni leaking.

【Strumentu Applicabile】

Adatta per Sistema di analisi PCR LC480, Sistema di analisi PCR automaticu Gentier 48E, Sistema di analisi PCR ABI7500.

【Requisiti di mostra】

1.Tipi di campionu Applicable: campioni di tamponi di gola.

Soluzione 2.Sampling:Dopu a verificazione, hè cunsigliatu di utilizà un tubu saline normale o di preservazione di Virus pruduciutu da a biologia di Hangzhou Testsea per a raccolta di campioni.

tampone di gola:pulisce e tonsille faringeali bilaterali è u muru faringeale posteriore cù un tampone di campionamentu sterile dispunibile, immerse u tampone in u tubu chì cuntene una soluzione di campionamentu 3mL, scartate a coda, è stringhje a tappa di u tubu.

3.Almacenamiento di mostra è spedizione:I campioni per esse testati devenu esse pruvati u più prestu pussibule.A temperatura di u trasportu deve esse mantinutu à 2 ~ 8 ℃. I campioni chì ponu esse pruvati in 24 ore ponu esse guardati à 2 ℃ ~ 8 ℃ è se i campioni ùn ponu esse pruvati in 24 ore, deve esse guardatu à menu o uguali. à -70 ℃ (se ùn ci hè micca una cundizione d'almacenamiento di -70 ℃, pò esse almacenatu temporaneamente à -20 ℃), evite ripetute

congelazione è scongelu.

4.Proper a cullizzioni di mostra, u almacenamentu è u trasportu sò critichi per u funziunamentu di stu pruduttu.

【Metudu di prova】

Trattamentu 1.Sample è aghjunghje campionu

1.1 Prucessu di mostra

Dopu avè mischjatu a suluzione di campionamentu di sopra cù i campioni, pigliate 30μL di u campione in u tubu di reagentu di liberazione di DNA è mischjallu uniformemente.

1.2 Carica

Pigliate 20μL di u reattivu di ricustituzione è aghjunghje à u reattivu di rilevazione MPV, aghjunghje 5μL di a mostra trattata sopra (U cuntrollu pusitivu è u cuntrollu negativu deve esse processatu in parallelu cù i campioni), copre a tappa di u tubu, centrifugate à 2000rpm per 10. seconde.

2. Amplificazione PCR

2.1 Caricà a piastra / i tubi PCR preparati à l'instrumentu PCR di fluorescenza, u cuntrollu negativu è u cuntrollu pusitivu deve esse stabilitu per ogni prova.

2.2 Impostazione di u canale fluorescente:

1) Sceglite u canale FAM per a rilevazione MPV;

2) Sceglite u canali HEX / VIC per a rilevazione di geni di cuntrollu internu;

3.Analisi di i risultati

Pone a linea di basa sopra u puntu più altu di a curva fluorescente di u cuntrollu negativu.

4.Control di qualità

4.1 Cuntrolu negativu: Nisun valore Ct rilevatu in FAM, canale HEX / VIC, o Ct＞40;

4.2 Cuntrolu pusitivu: In FAM, canale HEX / VIC, Ct≤40;

4.3 I requisiti di sopra deve esse soddisfatti in u stessu esperimentu, altrimenti i risultati di a prova ùn sò micca validi è l'esperimentu deve esse ripetutu.

【Tagliate u valore】

Una mostra hè cunsiderata cum'è pusitiva quandu: Sequenza di destinazione Ct≤40, U genu di cuntrollu internu Ct≤40.

【Interpretazione di i risultati】

Una volta chì u cuntrollu di qualità hè passatu, l'utilizatori anu da verificà s'ellu ci hè una curva di amplificazione per ogni mostra in u canali HEX / VIC, s'ellu ci hè è cun Ct≤40, hà indicatu chì u genu di cuntrollu internu hè amplificatu bè è sta prova particulare hè valida.L'utilizatori ponu passà à l'analisi di seguitu:

3.Per i campioni cù l'amplificazione di u genu di cuntrollu internu hà fallutu (HEX / VIC

canale, Ct＞40, o senza curva di amplificazione), bassa carica virale o l'esistenza di l'inibitore di PCR puderia esse u mutivu di fallimentu, l'esame deve esse ripetutu da a cullezzione di specimen;

4.Per campioni pusitivi è virus cultivati, i risultati di u cuntrollu internu ùn affettanu micca;

Per i campioni testati negativi, u cuntrollu internu deve esse testatu pusitivu altrimenti u risultatu generale ùn hè micca validu è l'esame deve esse ripetutu, partendu da u passu di raccolta di specimen.