SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit (Elisa)
IstradoPrinsipyo】
Ang pag-neutrisyon sa Sars-Cov-2 nga pag-neutralize sa pag-ila sa kit sa antibody gibase sa kompetisyon nga pamaagi sa ELISA.
Paggamit sa giputli nga receptor nga nagbugkos nga domain (RBD), protina gikan sa (mga) protina sa viral spike ug ang host cell
Receptor Ace2, kini nga pagsulay gidisenyo aron masundog ang pag-neutralize sa pakigsulti sa virus.
Calibrator, mga kontrol sa kalidad, ug serum o mga sample sa plas o plasma matag usa nga gisagol nga maayo sa pagtunaw
Ang Buffer nga adunay sulud nga hace2-HRP Conjugate nga gibag-o sa gagmay nga mga tubo. Pagkahuman gibalhin ang mga sagol
ang mga atabay sa mikroplate nga adunay sulud nga remobilizant Sars-Cov-2 RBD Fragment (RBD) alang sa
paglumos. Atol sa 30 minutos nga paglumlum, ang piho nga antibody sa RBD sa mga calibrator, QC ug
Ang mga sample makigkompetensya sa Hace2-HRP alang sa piho nga pagbugkos sa RBD nga wala matarug sa mga atabay. Human sa
Ang paglumlum, ang mga atabay gihugasan sa 4 ka beses aron makuha ang dili mabag-o nga hace2-hrp conjugate. Usa ka solusyon sa
Ang TMB dayon gidugang ug gipuno sa 20 minuto sa temperatura sa kwarto, nga miresulta sa pag-uswag sa a
asul nga kolor. Ang pag-uswag sa kolor gihunong sa pagdugang sa 1n HCL, ug ang pagsuhop mao
gisukod ang spectrophotometrically sa 450 NM. Ang kabaskog sa kolor nga naporma proporsyonal sa
Ang kantidad sa enzyme nga karon, ug ang sukwahi nga may kalabutan sa kantidad sa mga sukdanan gitinguha sa parehas nga paagi.
Pinaagi sa pagtandi sa calibration curve nga naporma sa mga gihatag nga calibrator, ang konsentrasyon sa
Ang pag-neutralize sa mga antibodies sa wala mailhi nga sample unya gikalkulo.
IstradoGikinahanglan ang mga materyales apan wala gihatag】
1. Displed o Deionized Water
2. Mga pipette sa katukma: 10μl, 100μl, 200μl ug 1 ml
3. Mga tipik sa pipette
4. Ang magbabasa sa Micropate nga makahimo sa pagbasa sa pagsabwag sa 450nm.
5. Absorbent Papel
6. Graph nga Paprap
7. Vortex mixer o katumbas
IstradoAng pagkolekta ug pagtipig】
1. Ang mga sample sa serum ug plasma nga nakolekta sa mga tubo nga adunay K2-EDTA mahimong magamit alang sa kini nga kit.
2. Ang mga espesimen kinahanglan nga ma-claped ug mahimong gitipigan hangtod sa 48 oras sa 2 ° C - 8 ° C sa wala pa managhunahuna.
Ang mga specimens nga gipahigayon alang sa usa ka taas nga oras (hangtod sa 6 nga bulan) kinahanglan nga i-frozen sa makausa ra sa -20 ° C sa wala pa ang assay.
Paglikay sa balikbalik nga mga siklo sa pag-freeze-thaw.
Protocol
IstradoReagent nga pag-andam】
1. Ang tanan nga mga reagentado kinahanglan kuhaon gikan sa pagpalamig ug gitugotan nga mobalik sa temperatura sa kwarto sa wala pa gamiton
(20 ° hangtod sa 25 ° C). I-save ang tanan nga mga reagents sa refrigerator pagkahuman gigamit.
2. Ang tanan nga mga sample ug kontrol kinahanglan nga vortexed sa wala pa gamiton.
3. Pag-andam sa Solution sa Hace2-HRP: Pag-undang sa Hace2-HRP nga magkonsentrar sa 1: 51 nga pagtunaw nga ratio nga dunay pagtunaw
Buffer. Pananglitan, tunawon ang 100 μl sa hace2-hrp nga magkonsentrar og 5.0ml sa HRP Dilutal Buffer sa
Paghimo usa ka solusyon nga Hace2-HRP.
4. 1 × nga pag-andam sa solusyon sa Solusyon: Pag-anam sa 20 × Hugasan nga solusyon sa deionized o distilled nga tubig nga adunay usa ka
Tomo nga ratio nga 1:19. Pananglitan, tunawon ang 20 ml nga 20 × hugasan nga solusyon nga adunay 380 ml nga deionized o
Dispedal nga tubig aron makahimo 400 ml nga 1 × hugasan nga solusyon.
IstradoPamaagi sa Pagsulay】
1. Sa lainlaing mga tubo, Aliquot sa 120μL sa usa ka andam nga solusyon sa Hace2-HRP.
2. Idugang ang 6 μl of calibrator, wala mahibal-an nga mga sampol, kalidad nga pagkontrol sa matag tubo ug isagol nga maayo.
3. Pagbalhin 100μl sa matag sagol nga giandam sa lakang 2 ngadto sa katugbang nga mga atabay sa mikropate sumala sa
sa predesigned nga pag-configure sa pagsulay.
3. Pagtabon sa plato nga adunay plate sealer ug i-incubate sa 37 ° C alang sa 30 minuto.
4. Kuhaa ang plate sealer ug hugasan ang plato nga adunay gibana-bana nga 300 μL nga 1 × hugasan sa matag pag-ayo sa upat ka beses.
5. Tapik ang plato sa tualya sa papel aron makuha ang nahabilin nga likido sa mga atabay pagkahuman sa paghugas sa mga lakang.
6
7. Idugang ang 50 μl sa paghunong sa solusyon sa matag atabay aron mapahunong ang reaksyon.
8. Basaha ang pagsuhop sa Micropate Reader sa 450 NM sulod sa 10 minutos (630nm ingon accessory
girekomenda alang sa mas taas nga pasundayag sa katukma).