Kit de detecció d’anticossos neutralitzant SARS-COV-2 （ELISA)
【Ús previst】
El kit de detecció d’anticossos neutralitzant SARS-COV-2 és un assaig immunosorbent vinculat a l’enzim competitiu (ELISA) destinat a la detecció qualitativa i semi-quantitativa d’anticossos neutralitzadors totals a SARS-COV-2 en sèrum humà i plasma. El kit de detecció d’anticossos neutralitzant SARS-COV-2 es pot utilitzar com a ajuda per identificar individus amb una resposta immune adaptativa a SARS-COV-2, cosa que indica una infecció recent o prèvia. El kit de detecció d’anticossos neutralitzant SARS-COV-2 no s’ha d’utilitzar per diagnosticar una infecció aguda SARS-CoV-2.
【Presentació】
Les infeccions per coronavirus indueixen normalment respostes neutralitzants als anticossos. Les taxes de seroconversió en pacients amb COVID-19 són del 50% i del 100% el dia 7 i 14 posteriors a l’aparició dels símptomes, respectivament. Per presentar el coneixement, l’anticòs neutralitzant el virus corresponent a la sang és reconegut com a objectiu per determinar l’eficàcia dels anticossos i una major concentració de l’anticòs neutralitzant indiquen una major eficàcia de protecció. La prova de neutralització de la reducció de la placa (PRNT) s'ha reconegut com a estàndard d'or per detectar anticossos neutralitzadors. No obstant això, a causa del seu baix rendiment i el seu major requisit per al funcionament, la PRNT no és pràctica per a serodiagnòstic a gran escala i avaluació de la vacuna. El kit de detecció d’anticossos neutralitzant SARS-COV-2 es basa en la metodologia de l’assaig immunosorbent vinculat a l’enzim competitiu (ELISA), que pot detectar l’anticòs neutralitzant en la mostra de sang, així com accedir especialment als nivells de concentració d’aquest tipus d’anticossos.
【Procediment de prova】
1. En tubs separats, Aliquot 120 µl de la solució HACE2-HRP preparada.
2.Add 6 µl de calibradors, mostres desconegudes, controls de qualitat a cada tub i barregeu -ho bé.
3.Transfer 100 µl de cada barreja preparada al pas 2 en pous de microplaques corresponents segons la configuració de prova predisignada.
3. Cover la placa amb segellador de plaques i incubeu a 37 ° C durant 60 minuts.
4.Emoveu el segellador de la placa i renteu la placa amb una solució aproximada de 300 µl de 1 × per pou durant quatre vegades.
5. Poseu la placa sobre la tovallola de paper per eliminar el líquid residual als pous després de rentar els passos.
6.ADD 100 µl de solució TMB a cada pou i incubeu la placa a fosc a 20 a 25 ° C durant 20 minuts.
7.ADD 50 µl de solució d’aturada a cada pou per aturar la reacció.
8. Llegiu l’absorbància en el lector de microplaques a 450 nm en 10 minuts (630nm com a accessori es recomana per a un rendiment de precisió més elevat.
