Kit de detecció d'àcids nucleics del virus de la verola del mico (MPV).

El kit conté reactius per processar 48 proves o control de qualitat, inclosos els components següents:

Reactiu A

ReactiuB

Nota: els components de diferents números de lot no es poden utilitzar indistintament

【Condicions d'emmagatzematge i vida útil】

1.El reactiu A/B es pot emmagatzemar a 2-30 °C i la vida útil és de 10 mesos.

2. Si us plau, obriu la tapa del tub d'assaig només quan estigueu preparat per a la prova.

3. No utilitzeu provetes més enllà de la data de caducitat.

4. No utilitzeu un tub de detecció de fuites.

【Instrument aplicable】

Adequat per al sistema d'anàlisi PCR LC480, sistema d'anàlisi PCR automàtic Gentier 48E, sistema d'anàlisi PCR ABI7500.

【Exemples de requisits】

1.Tipus de mostres aplicables: mostres de hisopos de gola.

2. Solució de mostreig:Després de la verificació, es recomana utilitzar una solució salina normal o un tub de preservació de virus produït per Hangzhou Testsea Biology per a la recollida de mostres.

hisop de gola:Netegeu les amígdales faríngies bilaterals i la paret posterior de la faríngia amb un hisop de mostreig estèril d'un sol ús, submergiu el hisop en el tub que conté 3 ml de solució de mostreig, descarteu la cua i premeu la coberta del tub.

3. Emmagatzematge i lliurament de mostres:Les mostres a provar s'han de provar tan aviat com sigui possible.La temperatura de transport s'ha de mantenir a 2 ~ 8 ℃. Les mostres que es poden provar en 24 hores es poden emmagatzemar a 2 ℃ ~ 8 ℃ i si les mostres no es poden provar en 24 hores, s'han d'emmagatzemar a menys o igual. a -70 ℃ (si no hi ha condicions d'emmagatzematge de -70 ℃, es pot emmagatzemar a -20 ℃ temporalment), eviteu repetir-ho

congelació i descongelació.

4. La recollida, l'emmagatzematge i el transport de mostres adequats són fonamentals per al rendiment d'aquest producte.

【Mètode de prova】

1.Processament de mostres i addició de mostres

1.1 Processament de mostres

Després de barrejar la solució de mostreig anterior amb mostres, agafeu 30 μL de la mostra al tub de reactiu d'alliberament d'ADN i barregeu-lo uniformement.

1.2 Càrrega

Agafeu 20 μL del reactiu de reconstitució i afegiu-lo al reactiu de detecció MPV, afegiu-hi 5 μL de la mostra processada anteriorment (el control positiu i el control negatiu es processaran en paral·lel amb les mostres), tapeu el tap del tub, centrifugueu-lo a 2000 rpm durant 10 segons.

2. Amplificació per PCR

2.1 Carregueu la placa/tubs de PCR preparats a l'instrument de PCR de fluorescència, s'ha d'establir un control negatiu i un control positiu per a cada prova.

2.2 Configuració del canal fluorescent:

1) Trieu el canal FAM per a la detecció de MPV;

2) Trieu el canal HEX/VIC per a la detecció de gens de control intern;

3.Anàlisi de resultats

Establiu la línia base per sobre del punt més alt de la corba fluorescent del control negatiu.

4.Control de qualitat

4.1 Control negatiu: no s'ha detectat cap valor de Ct al canal FAM, HEX/VIC o Ct＞40;

4.2 Control positiu: al canal FAM, HEX/VIC, Ct≤40;

4.3 Els requisits anteriors s'han de complir en el mateix experiment, en cas contrari, els resultats de la prova no són vàlids i l'experiment s'ha de repetir.

【Valor tallat】

Una mostra es considera positiva quan: Seqüència diana Ct≤40, El gen de control intern Ct≤40.

【Interpretació de resultats】

Un cop superat el control de qualitat, els usuaris haurien de comprovar si hi ha una corba d'amplificació per a cada mostra al canal HEX/VIC, si n'hi ha i amb Ct≤40, va indicar que el gen de control intern s'ha amplificat amb èxit i aquesta prova en particular és vàlida.Els usuaris poden procedir a l'anàlisi de seguiment:

3. Per a mostres amb l'amplificació del gen de control intern fallada (HEX/VIC

canal, Ct>40, o sense corba d'amplificació), baixa càrrega viral o l'existència d'inhibidor de PCR podria ser el motiu del fracàs, l'examen s'ha de repetir des de la recollida de mostres;

4.Per a mostres positives i virus cultivats, els resultats del control intern no afecten;

Per a les mostres negatives, el control intern s'ha de donar positiu, en cas contrari, el resultat global no és vàlid i l'examen s'ha de repetir, a partir del pas de recollida de mostres.