Komplet za detekciju nukleinskih kiselina virusa majmunskih boginja (MPV).

Komplet sadrži reagense za obradu 48 testova ili kontrolu kvaliteta, uključujući sledeće komponente:

Reagens A

ReagensB

Napomena: Komponente različitih brojeva serije ne mogu se koristiti naizmenično

【Uslovi skladištenja i rok trajanja】

1. Reagens A/B se može čuvati na 2-30°C, a rok trajanja je 10 mjeseci.

2. Otvorite poklopac epruvete tek kada ste spremni za test.

3. Nemojte koristiti epruvete nakon isteka roka trajanja.

4. Nemojte koristiti cijev za otkrivanje curenja.

【Primjenjivi instrument】

Pogodno za Pogodno za LC480 PCR sistem za analizu, Gentier 48E Automatski PCR sistem za analizu, ABI7500 PCR sistem za analizu.

【Zahtjevi za uzorke】

1. Primjenjivi tipovi uzoraka: uzorci briseva grla.

2. Rješenje za uzorkovanje:Nakon verifikacije, preporučuje se korištenje normalne fiziološke otopine ili epruvete za očuvanje virusa koju proizvodi Hangzhou Testsea biology za prikupljanje uzoraka.

bris grla:obrišite bilateralne faringealne krajnike i stražnji zid ždrijela jednokratnim sterilnim štapićem za uzorkovanje, uronite bris u epruvetu koja sadrži 3 mL rastvora za uzorkovanje, odbacite rep i zategnite poklopac epruvete.

3. Skladištenje i dostava uzorka:Uzorke koji se ispituju treba ispitati što je prije moguće.Temperaturu transporta treba održavati na 2~8℃. Uzorci koji se mogu testirati u roku od 24 sata mogu se čuvati na 2℃~8℃, a ako se uzorci ne mogu testirati u roku od 24 sata, treba ih čuvati na manje od ili jednako do -70 ℃ (ako nema uslova skladištenja od -70 ℃, može se privremeno čuvati na -20 ℃), izbegavajte ponavljanje

smrzavanja i odmrzavanja.

4. Pravilno prikupljanje uzoraka, skladištenje i transport su kritični za performanse ovog proizvoda.

【Testing Method】

1. Obrada uzorka i dodavanje uzorka

1.1 Obrada uzorka

Nakon što pomiješate gornju otopinu za uzorkovanje s uzorcima, uzmite 30 μL uzorka u epruvetu s reagensom za oslobađanje DNK i ravnomjerno promiješajte.

1.2 Učitavanje

Uzmite 20 μL reagensa za rekonstituciju i dodajte ga MPV reagensu za detekciju, dodajte 5 μL prethodno obrađenog uzorka (pozitivna kontrola i negativna kontrola će se obraditi paralelno sa uzorcima), pokrijte poklopac epruvete, centrifugirajte na 2000 o/min 10 sekundi.

2. PCR amplifikacija

2.1 Ubacite pripremljenu PCR ploču/epruvete u fluorescentni PCR instrument, negativna kontrola i pozitivna kontrola će se postaviti za svaki test.

2.2 Postavka fluorescentnog kanala:

1) Odaberite FAM kanal za MPV detekciju；

2) Odaberite HEX/VIC kanal za detekciju gena interne kontrole；

3. Analiza rezultata

Postavite osnovnu liniju iznad najviše tačke fluorescentne krive negativne kontrole.

4.Kontrola kvaliteta

4.1 Negativna kontrola: Nije otkrivena vrijednost Ct u FAM、HEX/VIC kanalu ili Ct＞40；

4.2 Pozitivna kontrola: U FAM、HEX/VIC kanalu, Ct≤40；

4.3 Gore navedeni zahtjevi bi trebali biti zadovoljeni u istom eksperimentu, inače su rezultati testa nevažeći i eksperiment treba ponoviti.

【Odrezana vrijednost】

Uzorak se smatra pozitivnim kada: Ciljna sekvenca Ct≤40, gen interne kontrole Ct≤40.

【Interpretacija rezultata】

Kada se prođe kontrola kvaliteta, korisnici bi trebali provjeriti da li postoji kriva amplifikacije za svaki uzorak u HEX/VIC kanalu, ako postoji i sa Ct≤40, to ukazuje da je gen interne kontrole uspješno amplificiran i da je ovaj određeni test validan.Korisnici mogu preći na naknadnu analizu:

3. Za uzorke sa neuspjelim amplifikacijom gena interne kontrole (HEX/VIC

kanal, Ct＞40 ili bez krivulje amplifikacije), nisko virusno opterećenje ili postojanje PCR inhibitora može biti razlog neuspjeha, pregled treba ponoviti iz uzimanja uzoraka;

4. Za pozitivne uzorke i kultivisan virus, rezultati interne kontrole ne utiču;

Za uzorke koji su negativni, interna kontrola mora biti pozitivna, inače je ukupni rezultat nevažeći i pregled se mora ponoviti, počevši od koraka prikupljanja uzoraka