SARS-CoV-2 নিউট্রালাইজিং অ্যান্টিবডি ডিটেকশন কিট (ELISA)

【উদ্দেশ্য ব্যবহার】

SARS-CoV-2 নিউট্রালাইজিং অ্যান্টিবডি ডিটেকশন কিট হল একটি প্রতিযোগিতামূলক এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস (ELISA) যা মানুষের সিরাম এবং প্লাজমাতে SARS-CoV-2-এর মোট নিরপেক্ষ অ্যান্টিবডিগুলির গুণগত এবং আধা-পরিমাণগত সনাক্তকরণের উদ্দেশ্যে। SARS- CoV-2 নিউট্রালাইজিং অ্যান্টিবডি ডিটেকশন কিটটি SARS- CoV-2-এর প্রতি অভিযোজিত প্রতিরোধ ক্ষমতা সম্পন্ন ব্যক্তিদের শনাক্ত করতে সাহায্য হিসেবে ব্যবহার করা যেতে পারে, যা সাম্প্রতিক বা পূর্বের সংক্রমণ নির্দেশ করে। SARS-CoV-2 নিউট্রালাইজিং অ্যান্টিবডি ডিটেকশন কিট তীব্র SARS-CoV-2 সংক্রমণ নির্ণয়ের জন্য ব্যবহার করা উচিত নয়।

【ভূমিকা】

করোনাভাইরাস সংক্রমণ সাধারণত নিরপেক্ষ অ্যান্টিবডি প্রতিক্রিয়া প্ররোচিত করে। কোভিড-১৯ রোগীদের মধ্যে সেরোকনভার্সন রেট যথাক্রমে 50% এবং 100% দিনে 7 এবং 14 পোস্টের লক্ষণ শুরু হয়। জ্ঞান উপস্থাপন করার জন্য, রক্তে অনুরূপ ভাইরাস নিরপেক্ষ অ্যান্টিবডি অ্যান্টিবডি কার্যকারিতা নির্ধারণের লক্ষ্য হিসাবে স্বীকৃত এবং নিরপেক্ষ অ্যান্টিবডির উচ্চ ঘনত্ব উচ্চ সুরক্ষা কার্যকারিতা নির্দেশ করে। প্লাক রিডাকশন নিউট্রালাইজেশন টেস্ট (পিআরএনটি) নিরপেক্ষ অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণের জন্য স্বর্ণের মান হিসাবে স্বীকৃত হয়েছে। যাইহোক, কম থ্রুপুট এবং অপারেশনের জন্য উচ্চতর প্রয়োজনীয়তার কারণে, পিআরএনটি বড় আকারের সেরোডায়াগনোসিস এবং ভ্যাকসিন মূল্যায়নের জন্য ব্যবহারিক নয়। SARS-CoV-2 নিউট্রালাইজিং অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ কিটটি প্রতিযোগিতামূলক এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাসে (ELISA) পদ্ধতির উপর ভিত্তি করে তৈরি, যা রক্তের নমুনায় নিরপেক্ষ অ্যান্টিবডি সনাক্ত করতে পারে এবং সেইসাথে এই ধরনের অ্যান্টিবডির ঘনত্বের মাত্রা বিশেষভাবে অ্যাক্সেস করতে পারে।

 【পরীক্ষা পদ্ধতি】

1. পৃথক টিউবে, প্রস্তুত hACE2-HRP সলিউশনের অ্যালিকোট 120μL।

2. প্রতিটি টিউবে 6 ​​μL ক্যালিব্রেটর, অজানা নমুনা, গুণমান নিয়ন্ত্রণ যোগ করুন এবং ভালভাবে মিশ্রিত করুন।

3. ধাপ 2-এ প্রস্তুত প্রতিটি মিশ্রণের 100μL পূর্বনির্ধারিত পরীক্ষার কনফিগারেশন অনুযায়ী সংশ্লিষ্ট মাইক্রোপ্লেট কূপে স্থানান্তর করুন।

3. প্লেট সিলার দিয়ে প্লেটটি ঢেকে দিন এবং 60 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে ইনকিউবেট করুন।

4. প্লেট সিলারটি সরান এবং আনুমানিক 300 μL 1× ওয়াশ সলিউশন দিয়ে চারবার ভাল করে প্লেটটি ধুয়ে ফেলুন।

5. ধাপ ধোয়ার পরে কূপের অবশিষ্ট তরল অপসারণ করতে কাগজের তোয়ালে প্লেটটি ট্যাপ করুন।

6. প্রতিটি কূপে 100 μL টিএমবি সলিউশন যোগ করুন এবং 20 মিনিটের জন্য 20 - 25 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় প্লেটটিকে অন্ধকারে সেঁকুন৷

7.প্রতিক্রিয়া বন্ধ করতে প্রতিটি কূপে 50 μL স্টপ সলিউশন যোগ করুন।

8. 10 মিনিটের মধ্যে 450 এনএম-এ মাইক্রোপ্লেট রিডারে শোষণ পড়ুন (উচ্চ নির্ভুলতা কর্মক্ষমতার জন্য আনুষঙ্গিক হিসাবে 630nm সুপারিশ করা হয়।