Набор для выяўлення нуклеінавых кіслот віруса воспы малпаў (MPV).

Набор змяшчае рэагенты для апрацоўкі 48 тэстаў або кантролю якасці, уключаючы наступныя кампаненты:

Рэагент А

РэагентB

Заўвага: кампаненты розных партый не могуць выкарыстоўвацца ўзаемазаменна

【Умовы захоўвання і тэрмін прыдатнасці】

1. Рэагент A/B можна захоўваць пры тэмпературы 2-30°C, тэрмін прыдатнасці складае 10 месяцаў.

2. Калі ласка, адкрыйце крышку прабіркі толькі тады, калі будзеце гатовыя да тэсту.

3. Не выкарыстоўвайце прабіркі пасля заканчэння тэрміну прыдатнасці.

4. Не выкарыстоўвайце трубку для выяўлення ўцечкі.

【Прыдатны інструмент】

Падыходзіць для Падыходзіць для сістэмы аналізу ПЦР LC480, сістэмы аўтаматычнага аналізу ПЦР Gentier 48E, сістэмы аналізу ПЦР ABI7500.

【Узоры патрабаванняў】

1. Дастасавальныя тыпы ўзораў: ўзоры мазкоў з горла.

2.Sampling раствор:Пасля праверкі рэкамендуецца выкарыстоўваць звычайны фізіялагічны раствор або прабірку для захавання вірусаў, вырабленую Hangzhou Testsea biology для збору проб.

мазок з горла:працярыце двухбаковыя глоточные міндаліны і заднюю сценку глоткі аднаразовым стэрыльным тампонам для ўзяцця проб, апусціце тампон у прабірку з 3 мл раствора для пробы, выкіньце хвосцік і зацягніце вечка прабіркі.

3. Захоўванне і дастаўка ўзораў:Узоры, якія падлягаюць тэсціраванню, павінны быць правераны як мага хутчэй.Тэмпература пры транспарціроўцы павінна падтрымлівацца на ўзроўні 2 ~ 8 ℃. Узоры, якія можна праверыць на працягу 24 гадзін, можна захоўваць пры тэмпературы 2 ℃ ~ 8 ℃, і калі ўзоры не могуць быць правераны на працягу 24 гадзін, яны павінны захоўвацца пры тэмпературы меншай або роўнай да -70 ℃ (калі няма ўмоў захоўвання -70 ℃, яго можна часова захоўваць пры -20 ℃), пазбягайце паўторнага

замарожванне і адтаванне.

4. Правільны збор узораў, захоўванне і транспарціроўка маюць вырашальнае значэнне для прадукцыйнасці гэтага прадукта.

【Метад тэставання】

1. Апрацоўка ўзору і даданне ўзору

1.1 Апрацоўка ўзору

Пасля змешвання вышэйзгаданага раствора для ўзяцця пробы з узорамі вазьміце 30 мкл пробы ў прабірку з рэагентам для вызвалення ДНК і раўнамерна змяшайце.

1.2 Загрузка

Вазьміце 20 мкл рэагента для аднаўлення і дадайце яго ў рэагент для выяўлення MPV, дадайце 5 мкл апрацаванага вышэй узору (станоўчы кантроль і адмоўны кантроль павінны апрацоўвацца паралельна з узорамі), накрыйце прабірку вечкам, цэнтрыфугуйце пры 2000 абаротаў у хвіліну на працягу 10 секунд.

2. ПЦР-амплификация

2.1 Загрузіце падрыхтаваныя пласціны/прабіркі для ПЦР у прыбор для флуарэсцэнтнай ПЦР. Для кожнага тэсту неабходна ўсталяваць адмоўны і станоўчы кантроль.

2.2 Налада люмінесцэнтнага канала:

1) Выберыце канал FAM для выяўлення MPV；

2) Выберыце канал HEX/VIC для выяўлення генаў унутранага кантролю；

3.Аналіз вынікаў

Усталюйце базавую лінію вышэй самай высокай кропкі флуоресцентной крывой адмоўнага кантролю.

4. Кантроль якасці

4.1 Адмоўны кантроль: значэнне Ct не выяўлена ў канале FAM、HEX/VIC або Ct>40;

4.2 Станоўчы кантроль: у канале FAM、HEX/VIC, Ct≤40;

4.3 Вышэйпаказаныя патрабаванні павінны быць выкананы ў адным і тым жа эксперыменце, у адваротным выпадку вынікі тэсту будуць несапраўднымі і эксперымент трэба паўтарыць.

【Адразае значэнне】

Узор лічыцца станоўчым, калі: мэтавая паслядоўнасць Ct≤40, ген унутранага кантролю Ct≤40.

【Інтэрпрэтацыя вынікаў】

Пасля праходжання кантролю якасці карыстальнікі павінны праверыць, ці ёсць крывая ампліфікацыі для кожнага ўзору ў канале HEX/VIC, калі яна ёсць і калі Ct≤40, гэта паказвае, што ген унутранага кантролю паспяхова ампліфікаваны і гэты канкрэтны тэст сапраўдны.Карыстальнікі могуць перайсці да наступнага аналізу:

3.Для ўзораў з ампліфікацыяй гена ўнутранага кантролю не атрымалася (HEX/VIC

канал, Ct>40, або адсутнасць крывой ампліфікацыі), нізкая вірусная нагрузка або наяўнасць інгібітару ПЦР можа быць прычынай няўдачы, абследаванне варта паўтарыць з збору ўзору;

4. Для станоўчых узораў і культывавання віруса вынікі ўнутранага кантролю не ўплываюць;

Для адмоўных узораў тэставанне ўнутранага кантролю павінна быць станоўчым, у адваротным выпадку агульны вынік будзе несапраўдным і абследаванне неабходна паўтарыць, пачынаючы з этапу збору ўзору