Meymun Çiçəyi Virusunun (MPV) Nuklein turşusunun aşkarlanması dəsti

Kitdə 48 testin işlənməsi və ya keyfiyyətə nəzarət üçün reagentlər, o cümlədən aşağıdakı komponentlər var:

Reagent A

ReagentB

Qeyd: Müxtəlif partiya nömrələrinin komponentləri bir-birini əvəz edə bilməz

【Saxlama Şərtləri və Raf Ömrü】

1.Reagent A/B 2-30°C temperaturda saxlanıla bilər, saxlama müddəti isə 10 aydır.

2. Sınaq borusunun qapağını yalnız sınaq üçün hazır olduqda açın.

3. İstifadə müddəti bitmiş sınaq borularından istifadə etməyin.

4. Sızıntı aşkarlayan borudan istifadə etməyin.

【Tətbiq olunan alət】

LC480 PCR analiz sistemi, Gentier 48E Avtomatik PCR analiz sistemi, ABI7500 PCR analiz sistemi üçün uyğundur.

【Nümunə tələbləri】

1.Tətbiq edilə bilən nümunə növləri: boğaz yaxma nümunələri.

2.Nümunə götürmə həlli:Doğrulamadan sonra nümunə toplamaq üçün Hangzhou Testsea biology tərəfindən istehsal olunan normal şoran məhluldan və ya Virus qoruyucu borudan istifadə etmək tövsiyə olunur.

boğaz çubuq:ikitərəfli faringeal badamcıqları və faringeal arxa divarı birdəfəlik steril nümunə götürmə tamponu ilə silin, tamponu 3ml nümunə götürmə məhlulu olan boruya batırın, quyruğu atın və borunun qapağını bərkidin.

3.Nümunənin saxlanması və çatdırılması:Sınaq ediləcək nümunələr mümkün qədər tez sınaqdan keçirilməlidir.Daşınma temperaturu 2 ~ 8 ℃ səviyyəsində saxlanılmalıdır. 24 saat ərzində sınaqdan keçirilə bilən nümunələr 2 ℃ ~ 8 ℃ temperaturda saxlanıla bilər və nümunələr 24 saat ərzində sınaqdan keçirilə bilməzsə, daha az və ya bərabər səviyyədə saxlanmalıdır. -70 ℃-ə qədər (-70 ℃ saxlama şəraiti yoxdursa, müvəqqəti olaraq -20 ℃-də saxlanıla bilər), təkrarlamadan çəkinin.

dondurma və ərimə.

4.Nümunənin düzgün toplanması, saxlanması və daşınması bu məhsulun işləməsi üçün çox vacibdir.

【Test üsulu】

1.Nümunənin işlənməsi və nümunənin əlavə edilməsi

1.1 Nümunələrin işlənməsi

Yuxarıdakı nümunə məhlulunu nümunələrlə qarışdırdıqdan sonra nümunədən 30μL DNT ayırma reagenti borusuna götürün və bərabər şəkildə qarışdırın.

1.2 Yüklənir

20 μL sulandırma reagentini götürün və MPV aşkarlama reagentinə əlavə edin, yuxarıda emal edilmiş nümunədən 5 μL əlavə edin (müsbət nəzarət və mənfi nəzarət nümunələrlə paralel şəkildə işlənməlidir), borunun qapağını örtün, 2000 rpm-də 10 dəqiqə sentrifuqa edin. saniyə.

2. PCR gücləndirilməsi

2.1 Hazırlanmış PCR boşqabını/borularını flüoresan PCR alətinə yükləyin, Hər bir test üçün mənfi nəzarət və müsbət nəzarət qurulmalıdır.

2.2 Floresan kanal parametrləri:

1) MPV aşkarlanması üçün FAM kanalını seçin；

2) Daxili nəzarət geninin aşkarlanması üçün HEX/VIC kanalını seçin；

3. Nəticələrin təhlili

Əsas xətti mənfi nəzarətin flüoresan əyrisinin ən yüksək nöqtəsindən yuxarıya qoyun.

4. Keyfiyyətə nəzarət

4.1 Mənfi nəzarət: FAM、HEX/VIC kanalında Ct dəyəri aşkar edilmədi və ya Ct＞40；

4.2 Müsbət nəzarət: FAM, HEX/VIC kanalında, Ct≤40；

4.3 Yuxarıdakı tələblər eyni təcrübədə təmin edilməlidir, əks halda sınaq nəticələri etibarsızdır və təcrübə təkrarlanmalıdır.

【Dəyəri kəsin】

Nümunə aşağıdakı hallarda müsbət hesab olunur: Hədəf ardıcıllığı Ct≤40, Daxili nəzarət geni Ct≤40.

【Nəticələrin təfsiri】

Keyfiyyətə nəzarətdən keçdikdən sonra istifadəçilər HEX/VIC kanalında hər bir nümunə üçün gücləndirmə əyrisinin olub olmadığını yoxlamalıdır, əgər varsa və Ct≤40 ilə bu, daxili nəzarət geninin uğurla gücləndirildiyini və bu xüsusi testin etibarlı olduğunu göstərir.İstifadəçilər sonrakı təhlilə davam edə bilərlər:

3.Daxili nəzarət geninin gücləndirilməsi uğursuz olan nümunələr üçün (HEX/VIC

kanal, Ct＞40 və ya gücləndirmə əyrisi yoxdur), aşağı Viral yük və ya PCR inhibitorunun mövcudluğu uğursuzluğun səbəbi ola bilər, müayinə nümunə kolleksiyasından təkrar edilməlidir;

4.Müsbət nümunələr və kultivasiya edilmiş virus üçün daxili nəzarətin nəticələri təsir etmir;

Mənfi sınaqdan keçmiş nümunələr üçün daxili nəzarət müsbət sınaqdan keçirilməlidir, əks halda ümumi nəticə etibarsızdır və nümunə toplama mərhələsindən başlayaraq müayinə təkrarlanmalıdır.