مجموعة الكشف عن الأجسام المضادة SARS-COV-2 （ELISA)
【الاستخدام المقصود】
مجموعة الكشف عن الأجسام المضادة SARS-COV-2 هي عبارة عن مقايسة مناعية تنافسية مرتبطة بالإنزيم (ELISA) مخصصة للكشف النوعي وشبه الكمي للأجسام المضادة الكلية لتحييد السارس -2 في المصل البشري والبلازما. يمكن استخدام مجموعة الكشف عن الأجسام المضادة Sars-CoV-2 كمساعد في تحديد الأفراد الذين لديهم استجابة مناعية تكيفية لـ Sars-CoV-2 ، مما يشير إلى العدوى الحديثة أو السابقة. يجب عدم استخدام مجموعة الكشف عن الأجسام المضادة SARS-COV-2 لتشخيص عدوى SARS-COV-2 الحادة.
【مقدمة】
العدوى فيروس كورونا عادة ما تحفز استجابات الأجسام المضادة. معدلات التحويل المصلي في مرضى COVID-19 هي 50 ٪ و 100 ٪ في اليوم 7 و 14 بداية الأعراض ، على التوالي. لتقديم المعرفة ، يشير الأجسام المضادة في الفيروس المقابلة في الدم في الدم كهدف لتحديد فعالية الأجسام المضادة وتركيز الأعلى للجسم المضاد المحايدة إلى زيادة فعالية الحماية. تم التعرف على اختبار تحييد تقليل البلاك (PRNT) كمعيار ذهبي للكشف عن الأجسام المضادة المحايدة. ومع ذلك ، بسبب انخفاض إنتاجيةها ومتطلباتها العالية للتشغيل ، فإن PRNT ليس عمليًا للتشخيص المصلي على نطاق واسع وتقييم اللقاح. تعتمد مجموعة الكشف عن الأجسام المضادة SARS-COV-2 على منهجية الفحص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) ، والتي يمكن أن تكتشف الجسم المضاد المحايدة في عينة الدم وكذلك الوصول إلى مستويات تركيز هذا النوع من الأجسام المضادة.
【إجراء الاختبار】
1. في أنابيب منفصلة ، قسامة 120 ميكرولتر من محلول HACE2-HRP المحضر.
2.ADD 6 ميكرولتر من المعايير ، وعينات غير معروفة ، وعناصر التحكم في الجودة في كل أنبوب وتخلط جيدا.
3.Transfer 100μl من كل خليط تم تحضيره في الخطوة 2 في آبار الألواح الدقيقة المقابلة وفقًا لتكوين الاختبار المصمم قبل التصميم.
3. قم بتوضيح اللوحة مع سدادات اللوحة واحتضانها عند 37 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة.
4. قم بإزالة السدادات للوحة وغسل اللوحة مع 300 ميكرولتر تقريبًا من محلول غسل 1 × لكل بئر لمدة أربع مرات.
5. قم بتصوير اللوحة على منشفة ورقية لإزالة السائل المتبقي في الآبار بعد خطوات الغسيل.
6.ADD 100 ميكرولتر من محلول TMB لكل بئر واحتضان اللوحة في الظلام عند 20 - 25 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة.
7.ADD 50 ميكرولتر من محلول إيقاف كل بئر لوقف رد الفعل.
8. اقرأ الامتصاص في قارئ الألواح الدقيقة عند 450 نانومتر في غضون 10 دقائق (يوصى بملحق 630nm كملحق للأداء الدقيق العالي.
