مجموعة أدوات الكشف عن الحمض النووي لفيروس جدري القرود (MPV).

تحتوي المجموعة على كواشف لمعالجة 48 اختبارًا أو مراقبة الجودة، بما في ذلك المكونات التالية:

الكاشف أ

كاشفB

ملاحظة: لا يمكن استخدام مكونات أرقام الدُفعات المختلفة بالتبادل

【ظروف التخزين ومدة الصلاحية】

1. يمكن تخزين الكاشف A/B عند درجة حرارة 2-30 درجة مئوية، ومدة الصلاحية 10 أشهر.

2. يرجى فتح غطاء أنبوب الاختبار فقط عندما تكون جاهزًا للاختبار.

3. لا تستخدم أنابيب الاختبار بعد تاريخ انتهاء الصلاحية.

4. لا تستخدم أنبوب كشف التسرب.

【أداة قابلة للتطبيق】

مناسب لنظام تحليل LC480 PCR، ونظام تحليل PCR التلقائي Gentier 48E، ونظام تحليل ABI7500 PCR.

【متطلبات العينة】

1.أنواع العينات القابلة للتطبيق: عينات مسحات الحلق.

2. حل أخذ العينات:بعد التحقق، يوصى باستخدام محلول ملحي عادي أو أنبوب الحفاظ على الفيروسات الذي تنتجه شركة Hangzhou Testsea Biology لجمع العينات.

مسحة الحلق:امسح اللوزتين البلعوميتين وجدار البلعوم الخلفي بمسحة عينات معقمة يمكن التخلص منها، واغمر المسحة في الأنبوب الذي يحتوي على محلول أخذ العينات 3 مل، وتخلص من الذيل، وأحكم غطاء الأنبوب.

3. تخزين العينات والتسليم:يجب اختبار العينات المراد اختبارها في أسرع وقت ممكن.يجب الحفاظ على درجة حرارة النقل عند 2 ~ 8 درجة مئوية. يمكن تخزين العينات التي يمكن اختبارها خلال 24 ساعة عند درجة حرارة 2 درجة مئوية ~ 8 درجة مئوية وإذا لم يكن بالإمكان اختبار العينات خلال 24 ساعة، فيجب تخزينها بدرجة حرارة أقل من أو تساوي إلى -70 درجة مئوية (إذا لم تكن هناك حالة تخزين تبلغ -70 درجة مئوية، فيمكن تخزينها في -20 درجة مئوية مؤقتًا)، وتجنب التكرار

التجميد والذوبان.

4. يعد جمع العينات وتخزينها ونقلها بشكل مناسب أمرًا بالغ الأهمية لأداء هذا المنتج.

【طريقة الاختبار】

1. معالجة العينات وإضافة العينة

1.1 معالجة العينات

بعد خلط محلول أخذ العينات أعلاه مع العينات، خذ 30 ميكرولتر من العينة في أنبوب كاشف إطلاق الحمض النووي وامزجها بالتساوي.

1.2 التحميل

خذ 20 ميكرولتر من كاشف إعادة التكوين وأضفه إلى كاشف كشف MPV، وأضف 5 ميكرولتر من العينة المعالجة أعلاه (يجب معالجة التحكم الإيجابي والتحكم السلبي بالتوازي مع العينات)، وقم بتغطية غطاء الأنبوب، وطرده بسرعة 2000 دورة في الدقيقة لمدة 10 ثواني.

2. تضخيم PCR

2.1 قم بتحميل لوحة/أنابيب PCR المعدة إلى جهاز PCR الفلوري، ويجب ضبط التحكم السلبي والتحكم الإيجابي لكل اختبار.

2.2 إعداد قناة الفلورسنت:

1) اختر قناة FAM للكشف عن MPV؛

2) اختر قناة HEX/VIC للكشف عن جينات التحكم الداخلي؛

3. تحليل النتائج

تعيين الخط الأساسي فوق أعلى نقطة في منحنى الفلورسنت للتحكم السلبي.

4. مراقبة الجودة

4.1 التحكم السلبي ： لم يتم اكتشاف قيمة Ct في قناة FAM 、 HEX / VIC أو Ct ＞ 40 ；

4.2 التحكم الإيجابي ： في قناة FAM 、 HEX / VIC ، Ct ≥40 ；

4.3 يجب استيفاء المتطلبات المذكورة أعلاه في نفس التجربة، وإلا فإن نتائج الاختبار باطلة ويجب إعادة التجربة.

【خفض السعر】

تعتبر العينة إيجابية عندما: تسلسل الهدف Ct≥40، جين التحكم الداخلي Ct≥40.

【تفسير النتائج】

بمجرد اجتياز مراقبة الجودة، يجب على المستخدمين التحقق مما إذا كان هناك منحنى تضخيم لكل عينة في قناة HEX/VIC، وإذا كان هناك ومع Ct≥40، فهذا يشير إلى أن جين التحكم الداخلي قد تم تضخيمه بنجاح وهذا الاختبار المحدد صالح.يمكن للمستخدمين المتابعة إلى تحليل المتابعة:

3. بالنسبة للعينات التي تحتوي على تضخيم لجينات التحكم الداخلي الفاشلة (HEX/VIC

القناة، Ct＞40، أو عدم وجود منحنى تضخيم)، أو انخفاض الحمل الفيروسي أو وجود مثبط PCR قد يكون سبب الفشل، ويجب تكرار الفحص من مجموعة العينات؛

4. بالنسبة للعينات الإيجابية والفيروس المزروع، لا تؤثر نتائج الرقابة الداخلية؛

بالنسبة للعينات التي تم اختبارها سلبية، يجب أن تكون نتيجة الفحص الداخلي إيجابية وإلا فإن النتيجة الإجمالية غير صالحة ويجب إعادة الفحص بدءاً من خطوة جمع العينات