SARS-COV-2 Neutraliserende teenliggaam-opsporingskit （Elisa)
【Bedoelde gebruik】
SARS-COV-2 Neutraliserende teenliggaam-opsporingskit is 'n mededingende ensiem-gekoppelde immunosorbent-toetsing (ELISA) wat bedoel is vir kwalitatiewe en semi-kwantitatiewe opsporing van totale neutraliserende teenliggaampies teen SARS-COV-2 in menslike serum en plasma. Die SARS-COV-2-neutraliserende teenliggaam-opsporingskit kan gebruik word as hulpmiddel om individue met 'n aanpasbare immuunrespons op SARS-COV-2 te identifiseer, wat 'n onlangse of voorafgaande infeksie aandui. Die SARS-COV-2-neutraliserende teenliggaam-opsporingskit moet nie gebruik word om akute SARS-COV-2-infeksie te diagnoseer nie.
【Bekendstelling】
Coronavirus -infeksies veroorsaak tipies neutraliserende teenliggaamrespons. Die serokonversiesyfers by COVID-19-pasiënte is onderskeidelik 50% en 100% op dag 7 en 14 na simptoom. Om kennis aan te bied, word die ooreenstemmende virusneutraliserende teenliggaampie in bloed 'n teiken erken vir die bepaling van die effektiwiteit van die teenliggaam en 'n hoër konsentrasie van die neutraliserende teenliggaampie dui op 'n hoër beskermingsdoeltreffendheid. Plaakverminderingsneutralisasietoets (PRNT) word erken as die goudstandaard vir die opsporing van neutraliserende teenliggaampies. Vanweë die lae deurset en 'n hoër vereiste vir werking, is PRNT egter nie prakties vir grootskaalse serodiagnose en die evaluering van die entstof nie. Die SARS-COV-2-neutraliserende teenliggaam-opsporingskit is gebaseer op mededingende ensiem-gekoppelde immunosorbent-toetsing (ELISA) -metodologie, wat die neutraliserende teenliggaam in bloedmonster kan opspoor en spesiaal toegang tot die konsentrasievlakke van hierdie tipe teenliggaampie kan kry.
【Toetsprosedure】
1. In aparte buise, aliquot 120μL van die voorbereide HACE2-HRP-oplossing.
2. Voeg 6 μl kalibrators, onbekende monsters, kwaliteitskontroles in elke buis en meng goed.
3. Trek 100μL van elke mengsel in die stap 2 in ooreenstemmende mikroplaatputte volgens vooraf -ontwerpte toetskonfigurasie.
3. Bedek die plaat met die plaatseëlaar en inkubeer vir 60 minute by 37 ° C.
4. Verwyder die plaatseëlaar en was die plaat met ongeveer 300 μl 1 × wasoplossing per put vir vier keer.
5. Tik die plaat op die papierhanddoek om die residuele vloeistof in die putte te verwyder na wasstappe.
6. Voeg 100 μl TMB -oplossing vir elke put en inkubeer die plaat in die donker by 20 - 25 ° C vir 20 minute.
7. Voeg 50 μl stopoplossing vir elke put om die reaksie te stop.
8. Lees die absorbansie in mikroplaatleser binne 10 minute by 450 nm (630 nm, aangesien bykomstigheid aanbeveel word vir hoër presisieprestasie.
