Monkeypox Virus (MPV) Nukleïensuur Opsporing Kit

Die stel bevat reagense vir die verwerking van 48 toetse of gehaltebeheer, insluitend die volgende komponente:

Reagens A

ReagensB

Let wel: Die komponente van verskillende bondelnommers kan nie uitruilbaar gebruik word nie

【Bergingstoestande en raklewe】

1.Reagens A/B kan by 2-30°C gestoor word, en die raklewe is 10 maande.

2. Maak asseblief net die proefbuisdeksel oop wanneer jy gereed is vir die toets.

3.Moenie proefbuise na die vervaldatum gebruik nie.

4.Moenie 'n lekkende opsporingsbuis gebruik nie.

【Toepaslike instrument】

Geskik vir Geskik vir LC480 PCR-analisestelsel, Gentier 48E Outomatiese PCR-analisestelsel, ABI7500 PCR-analisestelsel.

【Voorbeeldvereistes】

1. Toepaslike monster tipes: keel depper monsters.

2.Sampling oplossing:Na verifikasie word dit aanbeveel om normale sout- of virusbewaringsbuis te gebruik wat deur Hangzhou Testsea biology vervaardig is vir monsterversameling.

keel depper:vee bilaterale faringeale mangels en posterior faringeale wand af met weggooibare steriele monsternemingsdepper, dompel die depper in die buis wat 3mL monsteroplossing bevat, gooi die stert weg en maak die buisdeksel styf.

3.Sample berging en aflewering:Die monsters wat getoets moet word, moet so gou moontlik getoets word.Die vervoertemperatuur moet op 2~8℃ gehou word. Die monsters wat binne 24 uur getoets kan word, kan by 2℃~8℃ gestoor word en as die monsters nie binne 24 uur getoets kan word nie, moet dit teen minder as of gelyk gestoor word tot -70 ℃ (as daar geen bergingstoestand van -70 ℃ is nie, kan dit tydelik by -20 ℃ gestoor word), vermy herhaaldelike

vries en ontdooi.

4. Behoorlike monsterversameling, berging en vervoer is van kritieke belang vir die prestasie van hierdie produk.

【Toetsmetode】

1.Sample verwerking en monster toevoeging

1.1 Monsterverwerking

Nadat die bogenoemde monsteroplossing met monsters gemeng is, neem 30μL van die monster in die DNA-vrystellingsreagensbuis en meng dit eweredig.

1.2 Laai

Neem 20μL van die rekonstitusie-reagens en voeg dit by die MPV-opsporingsreagens, voeg 5μL van die bogenoemde verwerkte monster by (Die positiewe kontrole en negatiewe kontrole moet parallel met die monsters verwerk word), bedek die buisdop, sentrifugeer dit teen 2000rpm vir 10 sekondes.

2. PCR amplifikasie

2.1 Laai die voorbereide PCR-plaat/-buise na die fluoressensie-PKR-instrument, Negatiewe kontrole en positiewe kontrole moet vir elke toets gestel word.

2.2 Fluorescerende kanaalinstelling:

1) Kies FAM-kanaal vir MPV-opsporing;

2) Kies HEX/VIC kanaal vir interne beheer geen opsporing;

3. Resultate-ontleding

Stel die basislyn bo die hoogste punt van die negatiewe kontrole se fluoresserende kurwe.

4.Gehaltebeheer

4.1 Negatiewe beheer: Geen Ct-waarde bespeur in FAM、HEX/VIC-kanaal, of Ct＞40；

4.2 Positiewe beheer: In FAM、HEX/VIC-kanaal, Ct≤40；

4.3 Bogenoemde vereistes moet in dieselfde eksperiment bevredig word, anders is die toetsresultate ongeldig en moet die eksperiment herhaal word.

【Sny waarde af】

'n Monster word as positief beskou wanneer: Teikenvolgorde Ct≤40, Die interne beheergeen Ct≤40.

【Resultate interpretasie】

Sodra die kwaliteitskontrole geslaag is, moet gebruikers kyk of daar 'n amplifikasiekurwe vir elke monster in HEX/VIC-kanaal is, as daar is en met Ct≤40, het dit aangedui dat die interne beheergeen suksesvol geamplifiseer is en hierdie spesifieke toets is geldig.Gebruikers kan voortgaan met die opvolgontleding:

3.Vir monsters met die amplifikasie van interne beheer geen misluk (HEX/VIC

kanaal, Ct＞40, of geen amplifikasiekurwe), lae virale lading of die bestaan ​​van PCR-inhibeerder kan die rede vir mislukking wees, die ondersoek moet herhaal word vanaf die monsterversameling;

4.Vir positiewe monsters en gekweekte virus, beïnvloed die resultate van interne beheer nie;

Vir monsters wat negatief getoets is, moet die interne beheer positief getoets word anders is die algehele resultaat ongeldig en die ondersoek moet herhaal word, vanaf die monsterversamelingstap